Produkty získané in vitro cyklikací a obohacením RNase R vyžadují další odstranění ze in vitro transkripcí (IVT), včetně nezpracovaných substrátů z reakce cyklikace, reakčních vedlejších produktů a poškozeného RNA.
Yaohai Bio-Pharma má dospělé LiCl sedimentační metody, magnetické částice na čištění, samostatně vyvinuté čištění a jiné rozmanité čištění řešení pro účinné odstranění různých im purity a přípravu vysokoprvé circRNA.
Čištění řešení pro malé množství circRNA pro buněčné transfekce a jako součást živočišných experimentů.
Čistící řešení pro malé množství circRNA pro transpekci buněk a jako součást živočišných experimentů.
Aplikační scénáře s vyšší kvalitou;
Stabilní a škálovatelný proces čištění splňující požadavky GMP výroby.
Proces | Volitelná služba | Detaily služby | Doba dodání (den) | Dodávané výsledky |
čištění circRNA | Konvenční čistící řešení | Konzolidace chloridem litným | 1 | látka z circRNA |
Čištění magnetickými částicemi | ||||
Vysokoprvosté čištění circRNA | Přípravná vysoko-výkonná kapalná chromatografie (HPLC) | 1-2 | ||
Výměna.bufferu | Ultrafiltrace | 1 | ||
kontrola kvality circRNA | Koncentrace⁄čištění | Ultravioleťová (UV) spektrofotometrie | 0.5 | Zkušební zpráva |
Čistota | Elektroforeze v agárovém geлу (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - volitelné | 1 |
Mohou být dosaženy aplikativní scénáře.
circRNA s čistotou více než 90%;
Přes prostřednictví přísné kontroly RNasů v experimentálním prostředí a spotřebičích je účinně zabráněno degradaci RNA.
Yaohai Bio-Pharma vyvinula zralé řešení pro čištění circRNA, které může účinně odstranit různé procesně související nečistoty.
Cirkulární RNA produkty čištěné konvenčním řešením jsou stále zjevně smíšeny s poškozenou RNA a introny.
Po použití čištění vyvinutého Yaohai Bio-Pharmou lze úspěšně odstranit různé lineární RNA nečistoty, jako jsou poškozené RNA a introny.
ověření expresivity circRNA
Pomocí konvenčních liposomů je purifikovaná eGFP circRNA transfekována do buněk 293T a po 24 hodinách je pozorován fluorescenční signál, který se po 48 hodinách dále zvyšuje. Fluorescenční signál je stále detekovatelný na 7. den a 14. den po transfekci.