Betydelsen av Strain Engineering
Strain engineering syftar till att göra uttrycket värd med egenskaper för förväntningar, vilket är nödvändigt för biologisk CMC-utveckling och bestämmer kvaliteten och konsistensen hos produkten och tillverkningsprocessen.
Nyckelord: stamgenteknik och screening, proteinuttrycksstamkonstruktion, mikrobiell cellteknik, bakteriestamteknik, jäststamsteknik, prokaryotisk mikroorganismkonstruktion, eukaryot mikroorganismteknik, manipulerad stam
Användning: humanmedicin, djurmedicin, vaccin, syntetisk biologi, rekombinanta stormolekylära biologiska läkemedel, biologiskt reagens
Stam Engineering Services av Yaohai Bio-Pharma
Genom att dra nytta av över 10 års CDMO-erfarenhet inom mikrobiella biologiska läkemedel, har vi samlat på oss rika erfarenheter av konstruktion och urval av olika typer av plasmidvektorer och mikrobiella värdar (bakterier, jäst). Vi kan hitta det bästa uttryckssystemet för dina unika biologiska läkemedel.
Vi samlade in olika mikrobiella värdar med tydliga källor och standard CoA, inklusive
Bakterie: Escherichia coli (E. coli)
Jäst: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Service detaljer
Tjänster
|
Service detaljer
|
Minsta tidslinje/dag
|
Deliverables
|
Strain Engineering
|
Gen knock-out, eller gen deletion
|
TBD
|
Stamteknisk rapport
|
Gen knock-in, eller geninsättning
|
Stamkonstruktion (E.coli)
|
Plasmidtransformation (multivärdar)
|
5
|
COA för kommersiella värdar,
Stamkonstruktionsrapport
|
PCR-verifiering
|
Stamrening
|
Stamkonservering
|
Stamkonstruktion (jäst)
|
Beredning av kompetenta jästceller
|
10
|
Plasmidlinjärisering
|
Elektrotransformation
|
Resistens/Näringsbristscreening
|
Stamrening
|
Stamkonservering
|
Lämplig värdscreening
|
Plasmid- eller genom-DNA-extraktion
|
15-20
|
Värdscreeningsprocess,
Testrapport av konstruerade stammar
|
PCR-verifiering, nedbrytning av restriktionsenzym
|
Målgensekvensering
|
Screening av höguttrycksvärdar
|
Screening av värdar med genetisk stabilitet
|
Stamkonservering
|
Fallstudie
Konstruerad Hansenula polymorpha förbättrade HPV L1 VLP-expressionsutbytet.
Vi har etablerat jäst Hansenula polymorpha (H. polymorpha) ingenjörs- och screeningplattform för uttryck av rekombinanta proteiner/peptider. För det första genererade vi H. polymorpha proteasbriststammar genom riktad gendeletion. För det andra transformerades en vektor som bär HPV L1-genen till den kompetenta H. polymorpha cell. Slutligen screenar vi den bästa klonen från hundratals alternativ, med genetisk stabilitet och högproducerande egenskaper.
Våra servicefunktioner
Vi har visat expertis inom olika mikrobiella värdar, t.ex. Escherichia coli (E. coli) DH5a, TOP10, TranslO, BL10; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink stam 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) och Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Vi har erfarenhet av E.coli periplasmatisk sekretion, löslig och inklusionskroppsuttryck, såväl som intracellulärt eller sekretionsuttryck från jäst.
Vi tillsätter inga antibiotika eller lägger till antibiotikan under regulatorisk vägledning.
Vi etablerar en screeningplattform med hög genomströmning för att screena högproducerande och stabila stammar från över hundra kandidatstammar.
Vi ser till att processen för strain engineering och screening är spårbar, under Good Data and Record Management.