Analys av N-glykosyleringsställen är avgörande för att förstå glykanernas funktioner. Yaohai Bio-Pharma använder vätskekromatografi-masspektrometri (LC-MS) efter enzymatisk klyvning för N-glykosyleringsställe.
Vi har varit involverade i proteinstrukturkarakteriseringen av olika stora molekyler, inklusive rekombinanta subenhetsvacciner, nanokroppar/VHHs/enkeldomänantikroppar (sdAbs), antikroppsfragment, hormoner/peptider, cytokiner, tillväxtfaktorer (GF), enzymer, kollagener, etc.
Regulatoriska krav för N-glykosyleringsställe
Enligt ICH Q6B-riktlinjen, "för glykoproteiner bestäms kolhydratinnehållet (neutrala sockerarter, aminosocker och sialinsyror). Vidare analyseras strukturen av kolhydratkedjorna, oligosackaridmönstret (antennär profil) och glykosyleringsställena för polypeptidkedjan i bästa möjliga utsträckning.
Analytisk metod
Analys |
Metoder |
N-glykosyleringsställe |
Vätskekromatografi-masspektrometri (LC-MS) efter enzymatisk klyvning |
Förfaranden
1. Enzymnedbrytning av proteinet med hjälp av trypsin eller annat proteas
2. Separera fragment glykopeptider
3. Bekräfta N-glykosyleringsstället med LC-MS
4. Analysera data