N-glykanprofilering är avgörande för produktionen av bioläkemedel. Yaohai Bio-Pharma tillhandahåller profileringstjänst för N-glykaner med hjälp av vätskekromatografi-masspektrometri (LC-MS) av frigjorda och märkta glykaner. De allmänna stegen för att förbereda N-glykanprov inkluderar nedbrytning av glykoproteinet (GP), deglykosylering, rening, märkning/derivatisering och fastfasextraktion (SPE).
Vi har varit involverade i proteinstrukturkarakteriseringen av olika stora molekyler, inklusive rekombinanta subenhetsvacciner, nanokroppar/VHHs/enkeldomänantikroppar (sdAbs), antikroppsfragment, hormoner/peptider, cytokiner, tillväxtfaktorer (GF), enzymer, kollagener, etc.
Regulatoriska krav för N-Glycan-profilering
Enligt ICH Q6B-riktlinjen, "för glykoproteiner bestäms kolhydratinnehållet (neutrala sockerarter, aminosocker och sialinsyror). Dessutom analyseras strukturen av kolhydratkedjorna, oligosackaridmönstret (antennär profil) och glykosyleringsställena för polypeptidkedjan i den utsträckning det är möjligt.
Analytisk metod
| Analys |
Metoder |
| N-glykan profilering |
Vätskekromatografi-masspektrometri (LC-MS) analys av frisatta och märkta glykaner |
Förfaranden
1. Enzymatisk glykanfrisättning med peptid N-glykosidas F (PNGase F)
2. Derivatisering av frigjorda glykaner med 2-aminobensamid (2-AB)
3. Rening av de skördade N-glykanerna på en TSK Amide - 80 kolonn om stora mängder tvättmedel, icke-flyktiga salter eller material med fria aminogrupper är närvarande
4. Märkning med fluorescerande 2-aminobensamid (2-AB)
5. LC-MS-analys av märkta N-glykaner
6. Dataanalys
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEJ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
