Alla kategorier
Strain Screening

Strain Screening

Hemsida >  Microbial CDMO  >  Forskning & Upptäckt  >  Strain Screening

Strain Screening

Betydelsen av strain screening

Att skärma lämpliga värdorganismerna är nödvändigt för CMC-utvecklingen av biologiska produkter, vilket avgör kvaliteten och konsekvensen hos produkten och tillverkningsprocessen. Det direkta målet med värdskärning är att tillhandahålla en kandidatprimär cellbank (PCB) med höga uttrycksnivåer och hög stabilitet, både när det gäller passagesstabilitet och lagringsstabilitet. Skärning av lämpliga värdar är nödvändig av två huvudsakliga skäl:

- För det första, att välja den mikrobiella värd som har hög uttrycksnivå. Det finns flera kommersiellt tillgängliga stammar som används för att uttrycka olika typer av proteiner, som toxinska proteiner, lösliga proteiner eller eukaryotiska proteiner.

- För det andra, att skärmning av värd med genetisk stabilitet. Testning av genetisk stabilitet är en nyckelpunkt under hela livscykeln för produktion. Det föreslås att hög genetisk stabilitet anses vara en annan nyckelkarakteristik för lämplig stam.

Nyckelord: urval av mikroberstam, skärmar av mikroberstam, höghastighetsskärmar av bakterier eller gärning, skärmar av högproducerande stammar, skärmar av högstabila stammar, testning av genetiskt stabila stammar Tillämpning: människomedicin, djurmedicin, vaccin, syntetisk biologi, rekombinant storföremål, biologiska reagenser

Stamtskärnings tjänster av Yaohai Bio-Pharma

Tack vare mer än 10 års erfarenhet som CDMO inom mikrobiella biologiska produkter stöder vi utvecklingen och tillverkningen av olika stora molekyler, inklusive rekombinanta subenhet-vacciner, virusliknande partiklar (VLP), hormoner (insulin, GLP-1, växtväxthormon), cytokiner (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), växtväxthormoner (EGF, FGF, NGF), nanokroppar/Enkeldomänantikroppar (sdAbs), enzym, etc.

Vi har ackumulerat rika erfarenheter i val av olika typer av plasmidvektorer och mikrobiella värdar, inklusive bakterier Escherichia coli (E. coli), och jäs Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Vi kan hitta det bästa expressionsystemet för dina unika biologiska produkter.

Vi har samlat in various mikrobiella värdar med klara källor och standardiserade CoA, inklusive E.coli expression och jästexpression.

Tjänstdetaljer

Tjänster

Tjänstdetaljer

Minsta tidsram/dag

Leveranser

Strukturell konstruktion (E. coli)

Plasmidtransformation (flera värdar)

5

COA för kommersiella värdar Rapport om strukturell konstruktion

PCR-verifiering

Stamrensnings

Stamkonservering

Stamskonstruktion (jäst)

Förberedelse av kompetenta jäsarceller

10

Plasmidlinjärisering

Elektrotransformation

Resistens/Näringsbristsskärning

Stamrensnings

Stamkonservering

Lämplig värdskärning

Plasmid- eller genom-DNA-extraktion

15-20

Värdskaresprocess COA för konstruerade stammar

PCR-verifiering, restriktionsenzymdigestion

Målgenssekvensering

Skärning av värdar med hög expression

Skärning av värdar med genetisk stabilitet

Stamkonservering

Fallstudie
En lämplig värd förbättrar proteinetiknivån med 2,5 gånger.

Vi har uppdraget att utveckla högpresterande E. coli stam. Och vi provade tre typer av kommersiella E. coli värdar, baserat på egenskaperna hos målproteinen. Det visades att stammen S1-1 och S1-2 (Fig A: Spår 1,2) förbättrade proteinnivån till 3,5 gånger mer än klientens ursprungliga stam (Fig A: Spår 3).

Utöver detta visade stammen S1-1 hög genetisk stabilitet (Fig B), och den ansågs som kandidatstam för grundläggande cellbankering (PCB).

图片2

Våra tjänstegenskaper

Bevisad expertis med olika mikrober värdar, t.ex., E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae och H. polymorpha .

Vi har erfarenhet av E. coli periplasmisk sekretion, löslig och inklusionskroppsuttryckning, liksom intracellulär eller sekretionsuttryckning i jäsar. Vi använder inga antibiotika eller följer regleringens riktlinjer när vi tillämpar antibiotika.

Vi etablerar en höghastighetsplattform för skärning av högproducerande och stabila stammar bland mer än ett hundra kandidatstammar.

Det garanteras att processen för stammingenjörskonst och skärmning är spårbar, enligt god data- och registerhantering.

Få en gratis offert

Get in touch