Bestämning av molekylvikt med LC-MS
Den oförändrade molekylvikten har alltid ansedits som en viktig karaktäristik för biologiska läkemedel. Analysering av oförändrad molekylvikt används för att demonstera protein/peptidprodukter och verifiera biologiska läkemedel. Mätning av molekylvikt är ett krav i regleringsriktlinjerna.
Yaohai Bio-Pharma erbjuder analys av oförändrad molekylvikt under nativa, reducerade och N-deglykosyerade villkor. Vi använder vätskechromatografi-masspektrometri (LC-MS) för att bestämma den oförändrade molekylvikten.
Regleringskrav för molekylvikt
I ICH Q6 rekommenderas det att ”molekylvikt (eller storlek) bestäms med hjälp av storleksexklusionskromatografi, SDS-polyacrylamidgelelektrofores (under reducerande och icke-reducerande villkor), masspektrometri (MS) och andra lämpliga tekniker”.
Analytiska Metoder
| Analys |
Metoder |
| Molekylvikt |
LC-MS / Vätskechromatografi/Elektrospray Massespektrometri (LC/ES-MS) av nativa, reducerade, N-deglykosylerade proteiner eller subenheter |
Analytiska Procedure
Odelad molekylvikt:
- Genomförande av LC-MS på det nativa provet som mottagits.
- Dataanalys för LC-MS.
Reducerad molekylvikt:
- Behandling av proteinprovet med en lämplig reduceringsagent;
- Genomförande av LC-MS på det reducerade proteinet;
- Dataanalys för LC-MS.
N-deglykosylerad molekylvikt:
- Borttagning av N-glykaner med en lämplig enzym;
- Att utföra LC-MS på det N-deglykosyerade proteinet;
- Dataanalys för LC-MS.
Reducerat och N-deglykosyerat molekylvikt:
- Behandling av proteinprovet med en lämplig reduceringsagent;
- Borttagning av N-glykaner med en lämplig enzym;
- Att utföra LC-MS på reducerat och N-deglykosyerat protein;
- Dataanalys för LC-MS.
Proteinsubunits molekylvikt:
- Subunit-klyvning
- Att utföra LC-MS på proteinsubunit
- LC-MS-dataanalys
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
