N-glykanprofiling är avgörande för produktionen av biomedicin. Yaohai Bio-Pharma erbjuder N-glykanprofilingstjänst med hjälp av Vätskechromatografi-Masspektrometri (LC-MS) av frigjorda och märkta glykaner. De allmänna stegen för att förbereda N-glykanprov inkluderar glykoproteindigerering (GP), de-glykosylering, renning, märkning/derivatisering och Fastfasextraktion (SPE).
Vi har varit inblandade i Proteinstrukturell karaktärisering av olika stora molekyler, inklusive Recombinant Subunit Vaccines, Nanokroppar/VHHs/En-domänantikroppar (sdAbs), Antikroppsfragment, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Växtfaktorer (GF), Enzymer, Kollagener mm.
Regleringskrav för N-Glykan Profiling
Enligt ICH Q6B-riktlinjen, ”för glykoproteiner bestäms kolhydrathalten (neutrala socker, aminosocker och sialinsyror). Dessutom analyseras strukturen av kolhydratkedjorna, oligosaccharidmönstret (antennär profil) och glykosléringsplatsen på polypeptidkedjan i den utsträckning som är möjlig.
Analytisk metod
| Analys |
Metoder |
| N-glykan profilering |
Vätskechromatografi-Masspektrometri (LC-MS)-analys av frigjorda och markerade glykaner |
Procedurer
1. Enzymatisk glykanfrigöring med Peptide N-Glykosidase F (PNGase F)
2. Derivatisering av frigjorda glykaner med 2-aminobenzamid (2-AB)
3. Renhetsförsäkring av de samlade N-glykanerna på en TSK Amide - 80 kolumn om stora mängder avtvättmedel, icke-volatila salt eller material med fria aminogrupper finns
4. Markeringsprocess med fluorescerande 2-aminobenzamid (2-AB)
5. LC-MS-analys av markerade N-glykaner
6. Dataanalys
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
