Olá. Já se perguntou como os cientistas podem clonar um RNA? O RNA é uma molécula especial que encontramos em nossas células que faz um monte de coisas para fazer proteínas, e as proteínas estão lá para que nosso corpo possa fazer todas as coisas certas. Nesta edição, faremos um passeio pelo protocolo muito mais curioso empregado por pesquisadores: transcrição in vitro. E tudo o que isso significa é que os cientistas estão pegando RNA e fazendo muito dele em um tubo de ensaio (que é um pequeno jarro que os laboratórios usam), então vamos entrar em cada etapa aqui.
Tendo terminado meu post anterior, percebi que o último pode ter sido um pouco seco-venha-juntar-a-diversão-no-laboratório-molhado; então, mantendo a forma agora que você está bem e verdadeiramente no trem da diversão (sic RNA-making): Quais reagentes e c precisará para seu EF?? Para conseguir isso, precisaremos de proteínas especiais chamadas enzimas, idênticas ao produto de Yaohai Fabricação de Midkine recombinante. Ela catalisa as reações químicas, essas enzimas ajudam na quebra. Então agora só precisamos do nosso pedaço de DNA. Essa função é o DNA que usamos como um modelo para copiar para o nosso RNA. Sequências regulatórias adicionais no RNA, ou seja, nucleotídeos, também são necessárias. Esses nucleotídeos são como pequenos blocos de construção que precisam ser montados para fazer o RNA. Também estamos empregando tubos curtos de pequeno diâmetro para unir a avaliação do sabor em outros. Por fim, precisamos de uma máquina (um termociclador) que garanta que nossas reações estejam na temperatura certa. Além disso, podemos precisar de algumas ferramentas e produtos para quaisquer experimentos específicos.
Então aqui as coisas divergem, temos uma fita de RNA e agora gostaríamos de ter mais cópias dela, também Fabricação de vacinas VLP conjugadas desenvolvido por Yaohai. A maneira de conseguir usar outra enzima; T7 RNA polimerase. Esta enzima única, por exemplo, reconhece áreas específicas dentro do RNA. um cone de salto para fazer muito mais cópias de RNA no processo. Neste ponto, mais será adicionado à fita de RNA pela T7 RNA polimerase até que uma massa de transcrito tenha sido criada, ou até que digamos para ela parar.
Depois de isolarmos o RNA o máximo possível, role mais para baixo para ver como limpar e armazenar o RNA para uso futuro. Rhoades: Alguns desses métodos são um pouco mais extremos em termos de isolamento de RNA — você nem sempre usaria isso, mas às vezes é necessário para certos tipos de experimentos. Uma vez que nosso RNA esteja livre de quaisquer contaminantes, ele pode ser armazenado congelado. Dessa forma, ele é seguro e podemos usá-lo mais tarde em vários experimentos.
Qualidade do material inicial: certifique-se de que seu molde de DNA esteja limpo e não todo queimado. Você também pode suplementar com nucleotídeos recém-reconstituídos e enzimas recém-descongeladas para maximizar as chances de um experimento bem-sucedido.
Condições de ajuste fino Todas as enzimas e seus nucleotídeos funcionam melhor em uma temperatura e pH específicos dentro do seu corpo, assim como os Yaohai mRNA vermelho fluorescente. Agora, ajuste um pouco a nuance entre as condições até chegar onde está a chave para sua configuração única.
A transcriptase reversa é uma enzima incomum, pois faz uma cópia de DNA de uma molécula de RNA. Usamos DNAs e um molde de DNA (o cDNA) como entrada para nosso método de transcrição in vitro para gerar RNA. No entanto, na maioria dos experimentos, os cientistas gostariam de transcrever DNA em RNA. A transcrição reversa é de onde ela obtém seu nome, o mesmo que Teste de distribuição de mRNA poli-A feito por Yaohai. É uma ferramenta inestimável em toda a ciência - Do estudo de moléculas de RNA dentro de células à produção de fitas complementares de DNA para experimentos posteriores.
Experimentos da vida real em que o RNA é uma das ferramentas moleculares mais comumente usadas, junto com o produto de Yaohai Produção de vacina VLP em E. coli. Ensaios quantitativos: Esses testes podem revelar a quantidade de qualquer molécula específica presente em uma amostra. Por exemplo, cientistas podem sintetizar uma preparação de transcrição in vitro de cópias de RNA derivadas de um gene alvo localizado dentro de uma célula. O diagnóstico pode então analisar essas cópias, no caso em que elas estão procurando por RNA, o diagnóstico pode executar uma reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificar essas cópias em uma amostra. Isso torna possível para cientistas verem como os genes são expressos em células, e até mesmo permite alguns ensaios de altíssimo rendimento, como a presença de uma infecção bacteriana ou viral, e diagnosticar distúrbios genéticos.
O Protocolo de Transcrição in vitro é líder em CDMO de biológicos microbianos. Nosso foco tem sido em vacinas e terapêuticas produzidas por micróbios que são adequadas para o gerenciamento da saúde humana, veterinária e de animais de estimação. Temos as plataformas de RD e tecnologia de fabricação mais avançadas que cobrem todo o procedimento, começando com o desenvolvimento de cepas microbianas e bancos de células, para o desenvolvimento de processos e métodos, para a produção comercial e clínica que garante a entrega bem-sucedida de soluções inovadoras. Ao longo do tempo, acumulamos vasto conhecimento em bioprocessamento baseado em micróbios. Mais de 200 projetos foram concluídos com sucesso e auxiliamos nossos clientes a cumprir regulamentações como as da US FDA e EU EMA. Também os ajudamos a navegar na Austrália TGA e China NMPA. Nossa expertise profissional e vasta experiência nos permitem responder rapidamente às demandas do mercado e fornecer serviços de CDMO personalizados.
A Yaohai Bio-Pharma tem experiência na produção de produtos biológicos criados a partir do Protocolo de Transcrição in vitro. Oferecemos soluções personalizadas de RD e fabricação, garantindo que não haja riscos. Estamos envolvidos em diversas modalidades, como vacinas de subunidade recombinantes, hormônios de peptídeos, citocinas, fatores de crescimento, enzimas de anticorpos de domínio único, DNA plasmídeo MRNA e muito mais. Somos especialistas em muitos microrganismos, incluindo secreção extracelular e intracelular de levedura (rendimentos de até 15 g/L), bem como solúvel intracelular de bactérias e corpo de inclusão (rendimentos de até 10 g/L). Também criamos uma plataforma de fermentação BSL-2 para criar vacinas bacterianas. Nosso foco é melhorar os processos, aumentar os rendimentos dos produtos e reduzir os custos de produção. Utilizando uma forte equipe de tecnologia, podemos garantir uma entrega rápida e confiável do projeto que levará seu produto ao mercado mais rapidamente.
A Yaohai Bio-Pharma, uma das 10 maiores fabricantes de produtos biológicos, é especializada em fermentação microbiana. Construímos uma instalação moderna com recursos robustos de RD e equipamentos avançados. Temos cinco linhas de fabricação de substâncias medicamentosas que estão em conformidade com os requisitos de GMP para fermentação e purificação microbiana. Também temos duas linhas de enchimento e acabamento automatizadas para cartuchos, frascos e seringas pré-cheias. As escalas de fermentação disponíveis para uso variam de Protocolo de Transcrição in vitro a 2000L. As especificações para o enchimento de um frasco variam de 1ml a 25ml. As especificações de enchimento de seringas pré-cheias ou cartuchos variam de aproximadamente 1-3ml. Nossa instalação de produção em conformidade com cGMP garante o fornecimento constante de amostras clínicas, bem como itens comerciais. Nossa planta produz grandes moléculas que são enviadas para o mundo todo.
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