mRNA syntetyzuje się poprzez transkrypcję in vitro (IVT) z linearyzowanego plazmidowego DNA (pDNA). Podczas procedury IVT powstają również pewne produkty uboczne, w tym dwuniciowy RNA (dsRNA) zidentyfikowany jako główne czynniki wyzwalające szlak odporności wrodzonej. Bardzo ważne jest usunięcie zanieczyszczeń i uzyskanie wysokiej wydajności czysty mRNA do badań mRNA in vitro/vivo i zastosowań terapeutycznych.
Yaohai Bio-Pharma opracowała zestaw technologii syntezy mRNA wysoce czysty mRNA, takie jak projektowanie i optymalizacja sekwencji, IVT, oczyszczanie, liofilizacja i kapsułkowanie nanocząstek lipidowych (LNP). Wszystkie produkty są wypuszczane zgodnie z rygorystycznymi standardami kontroli jakości. Chromatografia powinowactwa (AC), oparta na silnej i selektywnej interakcji pomiędzy ogonem 3' poliA mRNA z oligo dT w fazie stacjonarnej, jest wydajną i skalowalną strategią oczyszczania mRNA.
Dostarczane
| Produkt |
Dostosowane, wysoce czyste mRNA
|
| Długość |
100 ~ 10,000 XNUMX nukleotydów |
| Zawartość RNA |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Czystość |
A260 / A280 |
| Identyfikacja i czystość |
Elektroforeza w żelu agarozowym (AGE)
Elektroforeza kapilarna (CE)
|
| Bufor |
Woda wolna od RNaz (płyn) |
| Wysyłka |
Statek z suchym lodem; lub poniżej temperatury otoczenia |
| Magazynowanie |
● Ciecz o temperaturze -20°C lub niższej
● Liofilizowany proszek, w temperaturze 4°C
|
| Zastosowanie |
Opracowanie receptury LNP,
Testy komórkowe. Eksperyment na zwierzętach
|
Inne konfigurowalne opcje
| 5' Czapka |
● Bez ograniczeń
● Cap0, współograniczony
● Cap1, współograniczony
● Cap1, czapeczka enzymatyczna
|
| 5'UTR/3'UTR |
● Sekwencja natury UTR
● Zmutowana/zmodyfikowana sekwencja UTR
|
| 3' ogon PolyA |
● Ogon 100A ~120A (zalecany)
● Segmentowany ogon z poliA
● Inny niestandardowy ogon
|
| Zmodyfikowane nukleozydy |
● Niemodyfikowane podstawy,
● Pseudourydyna (Ψ),
● N1-metylopseudourydyna (N1Ψ),
● 5-metylocytozyna (m5C),
● 5-metylourydyna (m5U),
● 5-metoksyurydyna (5moU),
● 2-tiourydyna (s2U),
● 2′-O-metylo-U
● Pozostałe
|
Studium przypadku
Opracowaliśmy wieloetapowy proces oczyszczania chromatograficznego i przygotowaliśmy mRNA o wysokiej czystości i integralności (>95%).
Ryc. Analiza mRNA o wysokiej czystości (>98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NIE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
