LNP Lipid Composition Identification and Quantity
Betydningen av LNP-lipidsammensetningsanalyse
Lipid nanopartikler (LNP), som omfatter kationisk lipid, kolesterol, fosfolipid og PEG-konjugat lipid, tjener som fremtredende leveringssystemer for mRNA-medisinprodukter. Stabiliteten og dobbeltlagsfluiditeten til LNP-er avhenger av egenskapene og innholdet til de forskjellige lipidene som brukes i formuleringssystemet. Sammensetningen av lipidene er svært viktig for hvor godt LNP leverer legemidler.
Yaohai-BioPharma leverer løsninger for å identifisere og kvantifisere mRNA-LNP-lipidsammensetningen ved hjelp av høyytelses væskekromatografi med ladet aerosoldeteksjon (HPLC-CAD)-metoden.
Regulatoriske krav til lipidsammensetning
I følge WHOs regulatoriske betraktninger, "Den endelige sammensetningen av vaksinen, inkludert lipidene, bør beskrives sammen med mengden av komponentene i hver presentasjon."
Analytisk metode
Analyse |
Metoder |
Lipidsammensetning |
HPLC kombinert med Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
Prosedyre
Trinn 1. Lipidprøveforberedelse
Valget av fortynningsmiddel er av største betydning for analysen av lipidkomponenter i mRNA-LNP-legemiddelprodukter. Fortynningsmidlet skal effektivt løse opp hver lipidkomponent og forstyrre eventuelle interaksjoner mellom lipider og innkapslet mRNA. Potensielle fortynningsmidler omfatter etanol, etanol/dimetylsulfoksid (DMSO), etanol/formamid, etanol/trietylaminacetat og andre.
Trinn 2. HPLC-CAD
Omvendt fase væskekromatografi (RP-HPLC) sammen med en ladet aerosoldetektor (CAD) har blitt inkorporert i LNP-lipidsammensetningstesting. Gitt at lipider mangler kromoforer og ikke absorberer ultrafiolett (UV) stråling uten derivatisering, er fordampning vanligvis utfordrende. CAD, som er mer følsom, kan skjelne et bredere spekter av lipidinnhold. Tidligere ble en ultrahøy ytelse væskekromatografi (UHPLC) kombinert med en ladet aerosoldetektor (CAD) metode formulert og brukt i lipidanalyse for små interfererende RNA (siRNA) LNP-studier.
Trinn 3. Dataanalyse
Mengden av hvert lipid i prøven involverte beregninger utledet fra standardkurven multiplisert med fortynningsfaktoren. Denne prosessen ga lipidinnholdet for hver bestanddel i mRNA-LNP-prøven.
Tilfelle av LNP-lipidsammensetningsanalyse med HPLC-CAD
Basert på HPLC-CAD har Yaohai-BioPharma utviklet en robust metode for analyse av lipidkomponenter i mRNA-LNP. Denne metoden ble validert til å være lineær, repeterbar, presis, nøyaktig og spesifikk for LNP-formuleringer, som kunne støtte prosessutvikling, formuleringsutvikling, stabilitetstesting og mRNA-LNP-frigjøring.
Kromatografisk profil av 4 lipider ved Yaohai-BioPharmas HPLC-CAD-metode
Lineariteten til Yaohai-BioPharmas HPLC-CAD-metode (R2＞0.99)
EN
