כל הקטגוריות
מאמר

גילוי הדוזה האופטימלית של RNA דוחה eGFP

Nov 22, 2024

בביולוגיה מולקולרית ובביוטכנולוגיה, חלבון פלורסצנטי ירוק מופעל (eGFP) הפך לגן דיווח מרכזי בשל היכולת שלו להפיק פלורסצנט ירוק חזק ב-509 ננומטר. החלבון הזה, שמקורו ביונקים מהזוכי Aequorea victoria, משמש כמציין תקף ישירות בתרבויות תאים יונקים, ומאפשר את מעקב והרחבת יעילות התראפה. עם זאת, עולה השאלה: מה המידה האופטימלית של RNA דיווח eGFP כדי להשיג רמות ביטוי正如 הרצוי?

מחקרים הראו כי יעילותה של רנ"א דוחה eGFP תלויה בצורה כבדה בכמות שלה, במיוחד בהקשר של רנ"א מעגלית (circRNA) ו-rna מגדלת את עצמה (saRNA). מחקרים שנערכו על ידי קבוצת Katrien Remaut בקבוצת המחקר ננומדיצין באוניברסיטת גנט הדגישו את הקשר המורכב בין הכמות של saRNA והיעילות של תרגומה בתאים רטינליים. הם גילו שكمויות קטנות של saRNA, מתחת ל порог להפעלת מערכת החיסונית הפנימית, מאפשרות ביטוי חלבוני יעיל. זה מדגיש את חשיבותה של הבנה מדויקת של שליטה בכמות כדי לנצל את הפוטנציאל המלא של רנ"א דוחה eGFP.

בת Peblications מעשיות, ריכוזי mRNA של eGFP שמשתמשים בהם בדרך כלל יכולים להשתרע ממיקרוגרמים (μg) לנגראמים במקליטר (ng/μL). למשל, בניסויי טרנספקציה, הוכחו דosiים שבין 0.05 μg ל-0.5 μg של mRNA של eGFP כהופכים לביעור משמעותי בระמות בדגמי תאים שונים, עם אחוזי תאים חיוביים המגיעים עד 99-100% במקרים מסוימים. importantly, ב-dosiים מתחת ל-0.1 μg, saRNA מראה רמות ביעור גבוהות יותר בהשוואה ל-mRNA ליניארי, מה שממחיש את יתרונו של ההגדלה העצמית.

המגוון של mRNA דיווח eGFP נובע לא רק מאורו ויציבותם הפלאורסנטית אלא גם מהאידפטביליות שלו לתצורות ניסוייות שונות. חוקרים יכולים להתאים את הדוסאז לצרכים הספציפיים שלהם, מה שאומר שליטה מדויקת ברמות הביעור הגנטי. תכונה זו גורמת ל-eGFP להיות כלי חסר ערך למחקר פונקציית הגן, לעקוב אחר גורל התאים ולעדכן פרוטוקולים של טרנספקציה.

בהתאם, הדוסאז' האופטימלית של RNA דוחה eGFP תלויה מאוד בהקשר התجريיתי והנחות הרצויות. על ידי בחירה מeticulous של הדוסאז' המתאים, חוקרים יכולים לנצל את הפוטנציאל המלא של גן הדוחה המגוון הזה, להתקדם בהבנתנו של מנגנונים מולקולריים ולהדוף חדשנות בביוטכנולוגיה.

Yaohai Bio-Pharma היא הראשונה והגדולה ביותר מוקדשת ל-Biologics למערכת ביטוי מיקרוביאלית CRDMO בסין הגדולה. אנו מוסרנו את עצמנו כדי לענות על הצרכים הקליניים והמסחריים של לקוחותינו העולמיים עבור תרופות ביולוגיות, חיסונים ותחלילים לשימוש אנושי ובוטני.

אנו גם מחפשים שותפים גלובליים, سواء מוסדיים או אישיים. אנו מציעים את השכר התחרותי ביותר בתעשייה. אם יש לכם שאלות כלשהן, אנא לא猶ס להתקשר אלינו: [email protected]