תהליך ייצור של mRNA eGFP

היצור של mRNA של eGFP (חלבון פלורסנטי ירוק מוגבר) כולל סדרה של טכניקות ביולוגיה מולקולרית כדי להפיק מולקולה RNA פונקציונלית שמקודדת לביטוי של eGFP. בתחום של mRNA של eGFP, ל-Yaohai Bio-Pharma יש נסיון רחבה בהתייחס לצרכים הספציפיים של לקוחות. באמצעות ניסיוננו, סיכמנו את תהליך הייצור של mRNA של EGFP.

1. שיבוש הגן eGFP : כדי להשיג את סדרת הגנים המקודדת ל-eGFP. הגן הזה בדרך כלל נשייב משטח וקטור קדימוני או יוצר באופן מלאכותי על פי סדרת הניוקלוטידים הידועה. הגן השוייב אומת לאחר מכן באמצעות סדרה כדי לוודא דיוק.
2. הופעה של אופטימיזציה גנטית : כדי לבטא בצורה מיטבית את הגן במערכת היעד (לדוגמה, תאים שפיריים, חיידקים או מערכות התרת דנ"א מחוץ לגוף), הגן eGFP עשוי לעבור אופטימיזציה של קודונים. זה כולל החלפת קודונים נדירים בתיקון המקורי עם קודונים שנמצאים בשימוש תכוף יותר באורגניזם המארח, מה שמרבה את הסיכויים לתרגום יעיל.
3. מחוץ לגוף הכנה של תבנית התרת : לאחר שהגן האופטימיזי מוכן, הוא מוטמע בסוג מתאים של וקטור, בדרך כלל פלזמיד, שמכיל אלמנטים רגולטוריים הכרחיים להתרת (לדוגמה, סדרת מזרק). הפלזמיד משמש כתבנית להתרת מחוץ לגוף.
4. מחוץ לגוף התרת : תהליך הכתובת החיצוני מתבצע באמצעות תבנית פלזמיד מוכנה כדי להכין mRNA של eGFP. התהליך כולל שימוש באנזימים פולימראז RNA, שמזהים את סדרת המופר והם מתחילים את תהליך הכתובת, מייצרים שרשרת RNA מPLEMENTית לשרשרת DNA. בהתאם ליישום הרצוי, mRNA זה עשוי להיות מחובר בכפיפה, עם זנב פוליאדינין, ו/או מודifikasi כדי לשפר יציבות ויעילות תרגום.
5. הִטָהָרָה וּבִקּוּר מַסָע : mRNA של eGFP שהוכן נטהר לאחר מכן כדי להסיר כל חומרים זרים, כולל DNA, חלבונים ונוקלאוטידים חופשיים. שיטות טיהור עשויות לכלול אלקטרופורזיס בג'ל, כרומטוגרפיה בעמודה או הפרדה מבוססת כדורים. לאחר הטיהור, mRNA מאנalyzed עבור איכות, כולל ריכוז, טהרה ושלמות, באמצעות שיטות כמו ספקטרופוטומטריה UV-Vis ואלקטרופורזיס בג'ל.
6. הֶחְזָקָה וּמַסָע : mRNA של eGFP הטהורה בדרך כלל מאוחסנת בטמפרטורות נמוכות כדי להבטיח יציבות. למטרות תצוגה, mRNA זה יכול להועבר לתאים באמצעות מספר שיטות, כולל אלקטרופורציה, ליפוקציה או וקטורים ויראליים, בהתאם)application הספציפית וסוג התא המטרה.
7. ביטוי ותיעוד : לאחר שנכנס לתוך התא, mRNA של eGFP מתרגם לפוטון ירוק פלורסנטי מתקדם, שניתן לראותו באמצעות מיקרוסקופ פלורסנטי. זה מאפשר את תיעוד ההצלחה בהצלחה של ייצור mRNA, העברתו והביטוי שלה.

לסיכום, ייצור mRNA של eGFP כולל קローンת הגן, אופטימיזציה לביטוי, הכנת תבנית עבור תרנגולת ביו-תאית, ביצוע התגובה של התרנגולת, טיהור mRNA הנוצרת, והעברתה לבסוף לתאים לביטוי ותיעוד.

אנו גם מחפשים שותפים גלובליים, سواء מוסדיים או אישיים. אנו מציעים את השכר התחרותי ביותר בתעשייה. אם יש לכם שאלות כלשהן, אנא לא猶ס להתקשר אלינו: [email protected]