בקרת איכות ויישומים של חלבונים רקומביננטיים

בקרת איכות של חלבונים רקומביננטיים היא חיונית לאמינות ולשחזור של נתונים ניסיוניים. כל שלב, מתכנון הפרויקט ועד תהליך הייצור, דורש אסטרטגיות בקרת איכות מחמירות.

אסטרטגיות בקרת איכות

המגזר התעשייתי מקפיד על נהלי הפעלה סטנדרטיים מחמירים, בעוד שהקהילה האקדמית צריכה לשפר את הידע המקצועי כדי לשפר את יכולת השחזור של הנתונים. חלבונים עם יישומים ביולוגיים ספציפיים או מאפיינים ביוכימיים דורשים אסטרטגיות בקרת איכות (QC) מותאמות.

דוגמאות ופתרונות מאתגרים

Yaohai Bio-Pharma מתגאה בניסיון רב בייצור וטיהור חלבון רקומביננטי, יחד עם צוות מומחים, המבטיחים שייצור החלבון שלך יושלם בטוהר גבוה. מינוף הניסיון שלנו ממאות פרויקטים, יאוהאי מסכם בחביבות כיצד לייעל את טיהור החלבון.

חלבונים קושרים חומצות גרעין: שלבים להסרת חומצת גרעין, כגון נוקלאזות או משקעי PEI, נחוצים. היחס A260nm/A280nm מנוטר כדי לזהות זיהום חומצת גרעין.

Mouse Ferritin Heavy Chain 1 עבור cryo-EM: יש לבצע אופטימיזציה של שלבי הטיהור, ויש להוסיף נוקלאזות כדי להפחית את היחס A260nm/A280nm ולהבטיח טוהר החלבון.

חלבון כימרי dsRBEC אנושי: תמוגה של תאים משתמשת במאגר המכיל אוריאה, ולאחר מכן קיפול מחדש על העמוד כדי להשיג חלבונים פעילים באופן תפקודי.

חלבונים קושרים קטיונים דו ערכיים: יש להוסיף קטיונים דו ערכיים ספציפיים במהלך הביטוי והטיהור, ולהימנע מחומרים קלאטיים.

חלבוני ברזל-גופרית: יש להימנע מאימידאזול כדי למנוע הפרעה של צביר [2Fe ± 2S], מה שמבטיח קיפול ותפקוד חלבונים נכונים.

שבר מסיס של LLT1: עיצוב מוטנטי מייעל את יצירת קשרי דיסולפיד וקיפול חלבונים, וכתוצאה מכך חלבונים יציבים עם תשואה גבוהה.

CLK1 קינאז התגבשות: ביטוי משותף עם λ-פוספטאז מסיר פוספטים מאתרי זרחון, וכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל (SEC) וכרומטוגרפיה של חילופי אניונים משמשים להשגת CLK1 הומוגנית ללא זרחון הטרוגני.

חלבונים לשימוש באנטיגנים: הערכת טוהר הכרחית כדי למנוע זיהום עם חלבונים אימונוגניים מאוד. עבור נוגדנים אפיטופים מבניים, יש לשמור על הקונפורמציה התלת מימדית של האנטיגן.

חלבונים בעלי נטייה להצטברות: אסטרטגיות כגון סינון זנים שונים והורדת טמפרטורות הטיפוח משמשות כדי להגביל בעיות צבירה, ומתכננים אסטרטגיות טיהור מהירות.

הסרת אנדוטוקסין: שיטות כמו כרומטוגרפיה של מטען חיובי וכרומטוגרפיה של זיקה לליגנד פוליקציוני מסירות אנדוטוקסינים, מה שמבטיח שרמות ה-LPS יהיו מתחת לגבולות היישום.

תסביכי חלבון: יחידות משנה מבוטאות בנפרד ומורכבות במבחנה או מבוטאות יחד ליצירת קומפלקסים פונקציונליים. שלמות מורכבת מוערכת על ידי הומוגניות ומסה טוחנת.

סיכום

ייצור חלבון מתחיל בתכנון אסטרטגי, תוך התחשבות בתכונות ויישומים ביוכימיים. במהלך ביטוי, טיהור ו-QC, התנאים והשיטות מותאמים ליציבות, אי-צבירה ומצב מקורי. חלבונים מטוהרים משרתים שימושים שונים במורד הזרם, כמו אפיון ביופיזי.

Yaohai Bio-Pharma גם מחפשת באופן פעיל שותפים גלובליים מוסדיים או בודדים ומציעה את התמורה התחרותית ביותר בתעשייה. אם יש לך שאלות, אנא אל תהסס לפנות אלינו: [email protected]