בקרת איכות והישגיו של חלבוני רקורסומביננט

בקרת איכות של חלבונים רקורסיביים היא חיונית לאמינות ולשחזוריות של נתוני ניסוי. כל שלב, מהעיצוב של הפרויקט ועד תהליך הייצור, דורש אסטרטגיות בקרת איכות קשות.

אסטרטגיות בקרת איכות

ה섹טור התעשייתי מציית לתקנות פעילות סטנדרטיות מחמירות, בעוד שהקהילה האקדמית צריכה לשפר את הידע המקצועי כדי לשפר את שיחזוריות הנתונים. חלבונים עם יישומים ביולוגיים מסוימים או מאפיינים ביוכימיים דורשים אסטרטגיות בקרת איכות (QC) מותאמות.

דוגמאות מאתגרות ופתרונות

Yaohai Bio-Pharma מפיקה חלבונים רקורסיביים ויודפת אותם עם ניסיון רב, יחד עם צוות של מומחים, המבטיח שהייצור שלך יושלם באיכות גבוהה. על סמך הניסיון שלנו מאות פרויקטים, Yaohai מסכמת כיצד להיטיב את טיהור החלבונים.

חלבונים הקשורים לאצידים גנטיים: צעדי הסרה של חומצות גרעיניות, כמו נוקלאזות או תרשים PEI, הם הכרחיים. יחס A260nm/A280nm מונטור כדי לגלות תזוזה של חומצות גרעיניות.

פרוטאין פריטין כבד של עכבר 1 עבור קריו-EM: צעדי טיהור צריכים להופתח, ונוקלאזות צריכות להוסף כדי להפחית את היחס A260nm/A280nm ולהבטיח טהרת חלבונים.

חלבון שימורי אנושי dsRBEC: פירוק תאים נעשה באמצעות בופר המכיל אוריא פול, ולאחר מכן התפוקה מחדש על העמודה כדי לקבל חלבונים פעילים פונקציונלית.

חלבונים מחוברים לקטיווים דו-ערכיים: קטיווים דו-ערכיים ספציפיים חייבים להضاف במהלך הביטוי והטיהור, וצריך להמנע מאגנטים חלוצים.

חלבונים ברזל-סאלף: אימידאול צריך להימנע כדי למנוע הפרעה לקבוצה [2Fe ± 2S], מה שמבטיח כיווץ ופונקציה נכונים של החלבון.

חלק פתיר של LLT1: עיצובการออกแบบ המוטנט מיטיב בהרכבת קשרי הסולפיד הדו-ערכי ובתקיפת חלבונים, מה שמביא לחילובים יציבים ובעלות גבוהה.

קריסטליזציה של קינזס CLK1: הבעה משותפת עם פוספטאז λ מסירה פוספטים מאתרי פוספורילציה, וכרומטוגרפיה של חלוקה לפי גודל (SEC) וכromatography החלפת יון נגטיבית משמשות כדי לקבל CLK1 הומוגנית ללא פוספורילציה הטרוגנית.

חלבונים לשימוש כאנטיגן: הערכת טהרה היא הכרחית כדי להימנע מתחליפי חלבונים אימונוגניים מאוד. עבור חלבוני מבנה לאנטיבדיס אפידוטים, יש לשמור על הקונפורמציה התלת-ממדית של האנטיגן.

חלבונים שסובלים מאגרגציה: סטרטגיות כמו בדיקת תתי-מינים שונים והקטנת טמפרטורת גדילה מופעלות כדי לצמצם בעיות אגרגציה, ותהליך טהרה מהיר מוכנן.

הסרת אנדוטוקסינים: שיטות כמו כרומטוגרפיה עם מטען חיובי וכרומטוגרפיה של ליגנד פוליקטיוני חיובי מסירות אנדוטוקסינים, ומבטיחות שהשלב LPS יהיה מתחת לגבולות השימוש.

אוסף חלבונים: היחידות המשניות ביטאו בנפרד והרכבו vitro או ביטאו יחד כדי ליצור קומפלקסים פונקציונליים. שלמות הקומפלקס נבדקה על ידי הומוגניות ומסה מולרית.

מסקנות

הפקת חלבונים מתחילת עם תכנון אסטרטגי, תוך אخذ בחשבון את התכונות הביוכימיות והיישומים. במהלך הביטוי, הטיהור והבקרת איכות, התנאים והשיטות מאופטים עבור יציבות, אי-התמזגות ומצבי מקור. חלבונים טהורים משמשים למגוון יישומים נוספים, כמו תיאור ביופיזי.

יאוהאי ביופרמה מחפשת גם כן שותפים גלובליים, מוסדיים או אישיים, ומציעה את התשלום הקומפטיטיבי ביותר בתעשייה. אם יש לכם שאלות כלשהן, אנא לא/Setezesist ליצור איתנו קשר: [email protected]