פלסמיד: מולקולת DNA מעגלית קטנה עם פוטנציאל גדול

פלסמידים, מולקולות DNA מעגליות קטנות, משמשות כווקטורים חיוניים לרקומבינציה של DNA במחקר ביולוגיה מולקולרית ובריפוי גנטי. התפוקה והאיכות של הפלסמידים הם מכריעים, כאשר פרופורציה מפותלת ותכולת אנדוטוקסין הם שני גורמים משמעותיים המשפיעים על איכות הפלסמיד.

תתי סוגים של פלסמיד

פלסמידים המופקים מ-Escherichia coli (E. coli) קיימים בתתי סוגים שונים: צורות סופר-קויל (SC), מעגליות פתוחות (OC) וליניאריות (L) (איור 1). ביניהם, פלסמידים מפותלים מפגינים יציבות מצוינת, אנטיגניות ויעילות טרנספקציה וביטוי גבוהה.

איור 1. תרשים סכמטי של תת-סוגי פלסמיד נפוצים

באלקטרופורזה של ג'ל agarose של DNA פלסמיד, סדר מהירות הנדידה הוא DNA supercoiled, DNA ליניארי ו-DNA מעגלי פתוח (איור 2).

איור 2. דפוס נדידת אלקטרופורזה ג'ל אגרוז של תת-סוגי פלסמידים שונים

Yaohai Bio-Pharma שיפרה ללא הרף את התהליכים והטכניקות שלה כדי להבטיח ששיעור ה- supercoiled של פלסמידים בדרגת טרנספקציה הוא ≥85% ושל פלסמידים בדרגת מחקר הוא ≥50%. להלן הדגמת מקרה (איור 3), שבו אלקטרופורזה של ג'ל agarose משולבת עם תוכנת Gel-Pro Analyzer כדי לזהות את הפרופורציה המסולסלת.

איור 3. תוצאות בדיקת איכות של פרופורציה של פלסמיד-על

אנדוטוקסין

אנדוטוקסין, מרכיב בדופן התא של חיידקים גראם-שליליים, מורכב בעיקר מליפופוליסכריד A (LPS-A) כמרכיב הרעיל שלו. במהלך מיצוי הפלסמיד, אנדוטוקסין משתחרר לתמיסת התמוגה, ופוגע קשות ביעילות של טרנספקציה של פלסמיד לתאים. בנוסף, זה יכול להפעיל תגובות חיסוניות לא ספציפיות בתאים, מה שמוביל לתוצאות חיוביות שגויות בניסויים.

Yaohai Bio-Pharma נוקטת בגישה של "אי-הקדמה" ו"הסרה גבוהה", תוך שליטה קפדנית על השימוש בריאגנטים וחומרים המכילים אנדוטוקסין לאורך תהליך הטיהור. החברה גם פיתחה שיטה יעילה להסרת אנדוטוקסינים, המציעה שלוש רמות של תכולת אנדוטוקסין: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg ו-≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma מחזיקה בקו שירות מיצוי פלסמידים בתפוקה גבוהה, המסוגל לספק 1 מ"ג של פלסמידים שחולצו תוך שבוע אחד. כברירת מחדל, הוא מספק יותר משבע בדיקות בקרת איכות (QC) כדי להבטיח אספקת פלסמידים באיכות גבוהה ובסטנדרט גבוה מנקודות מבט רבות.

אנחנו גם מחפשים באופן פעיל שותפים גלובליים מוסדיים או בודדים. אנו מציעים את הפיצוי התחרותי ביותר בענף. אם יש לך שאלות, אנא אל תהסס לפנות אלינו: [email protected]