השתלמויות של תהליך הטיהור לחומצת השורן הרקורסנטית

בשנים האחרונות, עליית מספר חולי סוכרת דחפה את הביקוש לאינסולין, אך אינסולין זול מזערי בהיצע. ייצור אינסולין יעיל וכלכלי הוא חיוני. בעיקר מיוצר באמצעות Escherichia coli (E. coli) וסוכרים בגלל צמיחה מהירה והוצאות נמוכות, אך E. coli מצריך תהליך מעבדה מורכב יותר.

סקירה של תהליך המעבדה הלא-תעשייתי:

הפרשת אינסולין אנושי רקורסנטי ממסת E. coli כוללת מספר שלבים, כולל שיקוף, כיבוס, פתירתיות וביקור, חיתוך, החלפת בופר, טיהור כרומטוגרפי, התקררות, חזרה לצורה המקורית, חיתוך אנזימטי ותמצית.

ל-Yaohai Bio-Pharma יש ניסיון רב בייצור והפרדה של אינסולין רקורסנטי, יחד עם צוות של מומחים, המבטיח שהייצור האינסוליני שלך יבוצע בהיעדיות גבוהה. בעזרת הניסיון שלנו מאות פרוייקטים, Yaohai מסכם כיצד להיטיב את תהליך ההפרדה של אינסולין אנושי רקורסנטי.

שחזור גוף כלול והריצת שטיפה:

תאים מפורקים באמצעות שיטות מכניות (כגון אולטרסוניקציה, הומוגניזציה בלחץ גבוה) או טיפול בליסוזים, ולאחר מכן משמשים חומרי שטיפה (המכילים אוריאה, טריטון X-100 וכו') כדי להסיר צמחونיות. במהלך השטיפה, יש לכוון את הפרמטרים כדי לוודא את איכות החלבונים תוך שליטה על ההוצאות.

המeltת גוף כלול ואוקסידציה:

מפרכים בקונCENTRATION גבוהה (כגון קלאוריד גואנידין ואוריאה) משמשים כדי להמelt את גופי הכלול, עם תוספת דית'יויתריאול או β-מרקטואתנול כדי למנוע את היווצרותן של קשרי דיסולפיד לא נכונים. pH וטמפרטורה משפיעות בצורה משמעותית על תגובות ההמelt והאוקסידציה.

חיתוך ושינוי חומר בסיס:

הפרדת סיאנוגן ברומיד משמשת להסרת חומצת האמינו התחלתית בקצה N, אך היא גורמת לבעיות של רעלנות וספציפיות נמוכה. באמצעות דיאליזה, אולטרא-פילטרציה או כרומטוגרפיה של חלוקה לפי הגודל, החלפת תבנית מסירה תרכובות מזיקות בהכנה לפעולה הבאה.

טהרת כרומטוגרפית והשחתה:

טכנשיטים כרומטוגרפיים שונים מופעלים לטיהור האינסולין, כולל כרומטוגרפיה באפיניטי, כרומטוגרפיה של החלפת יונים, כרומטוגרפיה בフェז הפוכה, כרומטוגרפיה של אינטראקציה הידרופובית וכרומטוגרפיה של חלוקה לפי הגודל. שיטות השחתה, כמו השחתה לפי pH וקריסטליזציה בזינק, משמשות להסרת טמאות וalconcentration של חלבונים.

השתהות מחדש:

חלבון محلול מוטמע בתבנית השתהות כדי לקדם את הקמתם הנכונה של קשרי הסולפיד והתקפלות חלבון. כרומטוגרפיה נוזלית לתיקון חלבון ודיאליזה הן גם שיטות המשמשות להשתהות.

הפרדה אנזימטית ותצרוף:

טריפסין וקרבוקסיפפטידאז B משמשים כדי לחתוך את ה-C-פפטיד, מה שמייצר את הדימר האקטיבי של אינסולין. לבסוף, קריסטליזציה וליאופיליזציה מופעלות כדי להסיר את המלחים והBUFFERS השארית, מכינים תכשיר יציב. חומרים נוספים ספציפיים (כמו צינק ופרוטמין) מוספים כדי לענות על צרכים קליניים שונים.

סיכום:

עיבוד בהמשך של אינסולין מ- E. coli הוא מורכב. דגש עתידי צריך להיות על אופטימיזציה של שלבים אלה עבור ייצור יעיל וכלכלי כדי לענות על הביקוש ולהפחית עלויות.

יאוהאי ביופרמה מחפשת גם כן שותפים גלובליים, מוסדיים או אישיים, ומציעה את התשלום הקומפטיטיבי ביותר בתעשייה. אם יש לכם שאלות כלשהן, אנא לא/Setezesist ליצור איתנו קשר: [email protected]