שיטות לשיפור תקופת הייצור של pDNA

היצור של DNA פלזמי (pDNA) תלוי ברקומבינציה גנטית, שמערבת את חיבור הגן המטרה וлементים אחרים כדי ליצור מבנה מעגלי סגור קוהולנטי. תרבית תאים בדנסיטות גבוהות Escherichia Coli וטהרה הם הדרכים העיקריות לייצור pDNA.

הפיתוח של תרפי תאים וגנים (CGT) ו-mRNA פתח אפשרויות חדשות למניעת מחלות אפידמיות וטיפול במחלות נדירות. הייצור התעשייתי של CGT ו-mRNA דורש pDNA באיכות גבוהה . לכן, תרבית מופתשת של E. coli ויציאה גבוהה של pDNA הן חיוניות עבור הכלכלה של חיסונים/תרופות מבוססי CGT ו-mRNA.

1. עלייה בביקוש אחר pDNA

לפי דוח שוק ייצור DNA פלזמי בארצות הברית, צפוי ששוק ה-CGT יגדל מ-7.2 מיליארד דולר ב-2023 ל-23.3 מיליארד דולר ב-2028.ßerdem, תרופה גנטית תהפוך לכיוון המוביל של CGT. מספר متزاים של תרapiות CGT מקבלות אישור להכנס לשוק, וקווים נוספים נכנסים לשלב קליני. כתוצאה מכך, הביקוש לפ-DNA עולה במהירות.

בנוסף לתרופות CGT, pDNA היא חומר גלם חיוני לייצור חיסונים mRNA. עם האינובציה התמדת בטכנולוגיית mRNA בתחומי חיסוני מחלות זיהומיות, חיסוני סרטן וטיפולים למחלות נדירות, גם הביקוש לפ-DNA יגדל מהר.

2. שיטות לשיפור תוצרת ה-pDNA

עם התגברות הביקוש לדנ"א פלזמי, המוקד של הפיתוח הטכנולוגי הנוכחי הוא על אופטימיזציה של אסטרטגיות פרמנטציה כדי לשפר את תקועי ה-pDNA. התנאים המפתח לפיתוח תהליך עליון כוללים רכיבים של תרבית תרבות, טמפרטורה, pH, חמצן דיסולב (DO), קצב ייצור ספציפי וסטרטגיות של fed-batch.

תרבית תרבות: התרבית תרבות לפרמנטציה של E. coli שמשתמש בה בייצור פלזמים היא בדרך כלל תרבית חצי-סינתטית. היא מורכבת ממקורות כרבון, מקורות ניטוגן, מלחים מינרליים ויסודות צעירים. ביניהם, סוגי המקורות של כרבון וניטוגן הם קריטיים לצמיחתם של E. coli ואיסוף התוצרים. מקורות כרבון נפוצים הם גלוקוז וגлицרול, ומקורות ניטוגן כוללים ניטוגנים אורגניים ומינרליים.ßerdem, יחס גבוה מדי של כרבון לניטוגן (C/N) יכול להאט את צמיחת הסוגה, בעוד יחס C/N נמוך מדי יכול לקדם צמיחה מהירה אך להגביל את איסוף התוצר.

טמפרטורה : הטמפרטורה האופטימלית לצמיחת E. coli היא 37°C. עם זאת, טמפרטורות נמוכות יותר (30-37°C) יכולות לשמש בפרמנטציה מוצקה כדי להפחית את קצב הייצור הספציפי המרבי, מה שיגביר את שכפול הפלזמיד. לפלזמידים רגישים לחום, עלייה בטמפרטורה ל-42°C יכולה לעורר כפלה במספר העתקים של הפלזמיד.

pH : ה-pH האופטימלי לצמיחת E. coli הוא 7±0.2. ה-pH של תערובת הפרמנטציה בדרך כלל נשמר באמצעות פומפי חומץ-בסיס.

עשות : טווח הקונסנtrציה הקריטי של חמצן דיסולב עבור E. coli הוא 20%-30%. חמצן דיסולב לא מספיק עלול לגרום לייצור מוגזם של חומצה אצטית, מה שמשפיע על צמיחת חיידקים ואף גורם לאוטוליזה חיידקית. חמצן דיסולב מוגזם יכול לגרום]intoxication] . גורמים המשפ השפיעים על חמצן דיסולב כוללים את מהירות ההמיה, שיעור התאירה וכו'.

אסטרטגית פרמנטציה מוזנת : פרמנטציה מוזנת מובחרת לעיתים קרובות לייצור פלזמידים. ראשית, היא מועילה בהישג פרמנטציה בצפיפות תאים גבוהה של E. coli, המגיבה בכמות גדולה יותר של ביומס, שמשתמשת כבסיס לייצור גבוה. שנית, הצמיחה המהירה מדי של Escherichia coli משפיעה על יציבות הפלזמיד. הוספת תזון מגבילה באמצעות צורת fed-batch יכולה לשלוט באופן הגיוני בקצב הצמיחה של E. coli , מה שמעלה את ייצור הפלזמיד. אסטרטגיית DO-stat היא בשימוש נפוץ כדי לשלוט בצורת fed-batch במהלך התסיסה של פלזמיד. יש גם מחקרים שמצביעים על האפשרות של אסטרטגיית pH-stat.

3. שירותים מוצעים על ידי Yaohai Bio-Pharma

Yaohai Bio-Pharma פיתחה פלטפורמה מתוחכמת לייצור פלזמידים. בנוסף, Yaohai Bio-Pharma שיפרה את תרביית הבסיס, תרבית ההאכלה ואסטרטגיית השליטה בתסיסה. תוך מחזור תרבות של 30 שעות, ייצור הפלזמיד עולה על 1g/L.

בנוסף, יאוהאי ביואו-פרמה מסוגל לספק פתרונות אופטימיזציה של תהליך מבוססי גורם יחיד או שיטות תכנון ניסויים (DoE) עבור פלסמידים שונים וחיידקים מארחים. יאוהאי ביואו-פרמה שואף להתקיים עם דרישות הלקוחות לתוצרת גבוהה באיכות ובמenny של פלסמיד.

Yaohai Bio-Pharma גם כן מבקשת באופן פעיל שותפים גלובליים, سواء מוסדיים או אישיים, ומציעה את התשלום המכריע ביותר בתעשייה. אם יש לכם שאלות כלשהן, אנא לא תהססו ליצור קשר: [email protected]