mRNA sintetizirana je in vitro transkripcijom (IVT) iz lineariziranog plazmidnog DNA (pDNA). Tijekom postupka IVT također se formiraju neki nepoželjni proizvodi, uključujući dvostruki RNA (dsRNA), koji su identificirani kao glavni okidači za innate imunski put. Ključno je ukloniti nepoželjne tvari i dobiti visoke količine čiste mRNA za in vitro/in vivo istraživanje mRNA i terapeutičke primjene.
Yaohai Bio-Pharma je uspostavila seriju tehnologija za sintezu mRNA kako bi pružila visoko čistu mRNA , poput dizajna i optimizacije niza, IVT-a, očišćavanja, liofilizacije i encapsulacije lipidnim nanoparticulama (LNP). Svi proizvodi se oslobađaju pod strognim standardima kontrole kvalitete. Afinitetno kromatografiranje (AC), temeljeno na jachom i selektivnom međudjelovanju između 3′ polia repa mRNA s fiksnom fazom oligo dT-a, predstavlja učinkovitu i skalabilnu strategiju očišćavanja mRNA.
Isporučivi
Proizvod |
Prilagođena Visoko Čista mRNA |
Duljina | 100~10.000 nukleotida |
Sadržaj RNA | 100 µg~10 mg (OD260) |
Čistoća | A260/A280 |
Identifikacija i čistoća |
Elektroforeza na agarosnom geлу (AGE) Kapilarna elektroforeza (CE) |
Amortizer | Voda bez RNase (tekuća) |
Slanje | Prevoz s suhom ledom; ili pri običnoj temperaturi |
SKLADIŠTENJE |
● Tekuće, na ili ispod -20°C ● Liofilizirani prah, na 4°C |
PRIMJENA |
Razvoj formulacija LNP Celijanske asiste, Događaj s životinjama |
Ostale prilagođene opcije
5' Kap |
● Neograničeno ● Cap0, zajednički ograničen ● Cap1, zajednički ograničen ● Cap1, enzimatsko ograničenje |
5' UTR/3' UTR |
● Prirodni UTR niz ● Mutirani/Proučeni UTR niz |
3' PoliA rep |
● 100A ~120A rep (preporučeno) ● Segmentirani poliA rep ● Ostali prilagođeni repovi |
Izmijenjeni nukleozidi |
● Nemodificirane baze, ● Pseudauredin (Ψ), ● N1-Metilpseudauredin (N1Ψ), ● 5-metilcitozin (m5C), ● 5-metiluridin (m5U), ● 5-metoksiuridin (5moU), ● 2-tio-uridin (s2U), ● 2′-O-metil-U ● OSTALO |
Studija slučaja
Razvili smo višekoraki proces čišćenja hromatografijom i pripremili mRNA s visokom čistoćom i integritetom (>95%).
Slika. Analiza mRNA s visokom čistoćom (>98%)