mRNA:ta on käytetty laajasti geenien tai proteiinien toimintojen tutkimuksessa. Samaan aikaan se on yleinen profylaktisten ja terapeuttisten biologisten aineiden kehittämisessä. Yleisenä RNA-molekyylien synteesistrategiana in vitro -transkription (IVT) avulla voimme saada räätälöityjä transkriptejä tehokkaasti.
Yaohai Bio-Pharma on kehittänyt joukon mRNA-synteesitekniikoita korkealaatuisen RNA:n tuottamiseksi, kuten sekvenssisuunnittelun ja optimoinnin, IVT:n, puhdistuksen, lyofilisoinnin ja lipidinanohiukkasten (LNP) kapseloinnin. Kaikki tuotteet julkaistaan tiukkojen laadunvalvontastandardien (QC) mukaisesti.
COVID-19-pandemian puhjettua vuonna 2020 mRNA-teknologia on edistynyt harppauksin, ja siihen liittyvä tutkimus ja sovellukset ovat saavuttaneet ennennäkemättömän kehityksen, mukaan lukien profylaktiset rokotteet tartuntatautien ehkäisyyn, terapeuttiset syöpärokotteet ja -lääkkeet, kasvainhoito, proteiini korvaushoito, regeneratiivinen lääketiede sekä solu- ja geeniterapia (CGT).
mRNA-rokote | mRNA-terapia |
|
Käsitellä asiaa | Valinnainen palvelu | Palvelun yksityiskohdat | Toimitusaika (työpäivä) | suorite |
mRNA-sekvenssin suunnittelu ja optimointi | Koodaussekvenssien suunnittelu ja optimointi | CDS-sekvenssin suunnittelu ja kodonin optimointi | 1-3 | Järjestystiedosto |
Ei-koodaavien sekvenssien suunnittelu ja optimointi | UTR-, polyA-sekvenssien suunnittelu ja optimointi | |||
Transkriptiomallin plasmidin valmistus | Rekombinanttiplasmidivalmiste | Geenisynteesi | 7-10 | |
Plasmidin monistus ja uutto | 4 | |||
Plasmidin linearisointi ja puhdistus | ||||
mRNA:n in vitro -transkriptio | Yhteistranskription rajaus (yksivaiheinen menetelmä) | In vitro -transkriptio (IVT) / Cap-analogi | 1-2 | N / A |
Nukleotidimuutokset (UTP/CTP-muunnokset) | ||||
DNA-templaatin poisto (DNaasi I) | ||||
Entsymaattinen rajoitus (kaksivaiheinen prosessi) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidimuutokset (UTP/CTP-muunnokset) | ||||
DNA-templaatin poisto (DNaasi I) | ||||
mRNA:n puhdistus (litiumkloridi/magneettiset helmet) | ||||
Entsymaattinen korkki | ||||
mRNA:n puhdistus | Perinteinen puhdistuskaavio | Litiumkloridisaostus | 1 | mRNA-lääkeaine |
Magneettisten helmien puhdistus | ||||
Kromatografiakolonnin puhdistuskaavio | Useiden kromatografiamenetelmien yhdistelmä | 1-2 | ||
Puskurin vaihto | Ultrafiltraatio | 1 | ||
mRNA:n lyofilisointi | lyofilisointi | Esipakastus | 2-3 | mRNA lyofilisoitu jauhe |
Ensisijainen kuivaus (sublimaatio) | ||||
Toissijainen kuivaus (desorptio) | ||||
mRNA-kapselointi | LNP-kapselointi | LNP-kapselointi | 2-3 | mRNA-LNPDrug-tuote |
Keskittäminen ja puskurin vaihto | ||||
mRNA:n laatuanalyysi | mRNA-lääkeaine/ lyofilisoitu jauhe | Keskittyminen, puhtaus | 1 | Testiraportti |
Eheys, rajoitustehokkuus, polyA-häntäjakauma | 2-5 | |||
mRNA-LNP-lääketuote | Kapseloinnin tehokkuus | 1 | ||
Partikkelikoko ja -jakauma | ||||
Pintavaraus | ||||
mRNA:n ilmentymisen validointi | 293T-solujen arviointi | Solujen pinnoitus | 4 | |
Solujen ohimenevä transfektio | ||||
Fluoresenssisignaalin havainnointi | 1-3 | |||
Western blot (WB) / entsyymi-immunosorbenttimääritys (ELISA) |
5' Cap | ▪ Korkkiton ▪ Cap0, co-capped ▪ Cap1, co-capped ▪ Cap1, entsymaattinen rajoitus |
5' UTR/3' UTR | ▪ Luonnon UTR-sekvenssi ▪ Mutantti/Engineered UTR-sekvenssi |
3' PolyA Tail | ▪ 100A ~ 120A Tail (suositus) ▪ Segmentoitu polyA-häntä ▪ Muut mukautetut hännät |
Modifioidut nukleosidit | ▪ Muokkaamattomat emäkset ▪ Pseudouridiini (Ψ) ▪ N1-metyyliseudouridiini (N1Ψ) ▪ 5-metyylisytosiini (m5C) ▪ 5-metyyliuridiini (m5U) ▪ 5-metoksiuridiini (5 moU) ▪ 2-tiouridiini (s2U) ▪ 2'-O-metyyli-U ▪ Muut muutokset |
Integroitu palveluvirta
Tarjoa joukko palveluita etupään sekvenssisuunnittelusta tausta-mRNA:n valmisteluun, laadunvalvontaan ja ilmentymisen validointiin.
Kansainvälinen huippuluokan sekvenssisuunnittelu ja optimointi
Ammattimainen mRNA-sekvenssisuunnittelu ja optimointi helpottavat tehokasta mRNA-ilmentymistä.
Monipuoliset nukleotidimuunnokset
Lisää tehokkaasti mRNA:n ilmentymistä ja vähentää mRNA:n haitallisia immuunivasteita.
Aikuinen puhdistusalusta
Yhdistämällä tavanomaista ja itse suunniteltua puhdistusmenetelmää saadaan erittäin puhtaita mRNA-näytteitä
Täydellinen QC-alusta
Paranna laadunvalvontavaihtoehtoja, jotta ne täyttävät rutiinitestien vaatimukset, kuten pitoisuus, A260/280-puhtaus ja eheys, sekä korkeat laadunvalvontavaatimukset, kuten rajauksen tehokkuus/polyA-jakauma.
Nopea toimitus
Räätälöity mRNA voidaan toimittaa jopa 7 päivässä lukuun ottamatta ulkoistettua sekvenssisynteesiä.