رونمایی از دوز بهینه RNA گزارشگر eGFP

در زیست شناسی مولکولی و بیوتکنولوژی، پروتئین فلورسنت سبز تقویت شده (eGFP) به دلیل توانایی آن در تولید فلورسانس سبز روشن در 509 نانومتر به عنوان یک ژن گزارشگر محوری ظاهر شده است. این پروتئین که در اصل از چتر دریایی Aequorea victoria جدا شده است، یک نشانگر تشخیص مستقیم در کشت سلولی پستانداران است که نظارت و بهینه سازی کارایی انتقال را تسهیل می کند. با این حال، این سوال مطرح می شود: دوز بهینه RNA گزارشگر eGFP برای دستیابی به سطوح بیان مطلوب چیست؟

تحقیقات نشان داده است که اثربخشی RNA گزارشگر eGFP به شدت به دوز آن بستگی دارد، به ویژه در زمینه RNA دایره ای (circRNA) و سیستم های mRNA خود تقویت کننده (saRNA). مطالعات انجام شده توسط تیم Katrien Remaut در گروه تحقیقاتی نانوپزشکی دانشگاه گنت، رابطه پیچیده بین دوز saRNA و کارایی ترجمه آن در سلول های شبکیه را برجسته کرده است. آنها کشف کردند که دوزهای پایین saRNA، زیر آستانه برای فعال سازی سیستم ایمنی ذاتی، بیان کارآمد پروتئین را تسهیل می کند. این امر بر اهمیت کنترل دقیق دوز در استفاده از پتانسیل کامل RNA گزارشگر eGFP تاکید می کند.

در کاربردهای عملی، غلظت رایج mRNA ژن eGFP می تواند از میکروگرم (μg) تا نانوگرم در میکرولیتر (ng/μL) متغیر باشد. به عنوان مثال، در آزمایشات ترانسفکشن، دوزهای مختلف از 0.05 میکروگرم تا 0.5 میکروگرم از mRNA ژن eGFP نشان داده شده است که سطوح بیان قابل توجهی را در انواع مختلف سلول نشان می دهد، با درصد سلولی مثبت در موارد خاص به 99-100٪ می رسد. قابل ذکر است، در دوزهای کمتر از 0.1 میکروگرم، saRNA سطوح بیان برتر را در مقایسه با mRNA خطی نشان می‌دهد و مزیت خودتقویت‌شوندگی آن را نشان می‌دهد.

تطبیق پذیری RNA گزارشگر eGFP نه تنها در فلورسانس روشن و پایدار آن است، بلکه در سازگاری آن با تنظیمات آزمایشی مختلف نیز نهفته است. محققان می توانند دوز را متناسب با نیازهای خاص خود تنظیم کنند و از کنترل دقیق سطوح بیان ژن اطمینان حاصل کنند. این ویژگی eGFP را به ابزاری ارزشمند برای مطالعه عملکرد ژن، نظارت بر سرنوشت سلول و بهینه‌سازی پروتکل‌های ترانسفکشن تبدیل می‌کند.

در نتیجه، دوز بهینه RNA گزارشگر eGFP به شدت به زمینه تجربی و نتایج مورد نظر بستگی دارد. با انتخاب دقیق دوز مناسب، محققان می‌توانند از پتانسیل کامل این ژن گزارشگر همه کاره استفاده کنند و درک ما از مکانیسم‌های مولکولی و ایجاد نوآوری در بیوتکنولوژی را افزایش دهند.

Yaohai Bio-Pharma اولین و بزرگترین بیولوژیک است که به سیستم بیان میکروبی CRDMO در چین بزرگ اختصاص داده شده است. ما متعهد هستیم که نیازهای بالینی و تجاری مشتریان جهانی خود را برای داروهای بیولوژیک، واکسن‌ها و دستگاه‌های تشخیصی برای استفاده انسانی و دامپزشکی برآورده کنیم.

ما همچنین به طور فعال به دنبال شرکای جهانی نهادی یا فردی هستیم. ما رقابتی ترین پاداش را در صنعت ارائه می دهیم. اگر سوالی دارید، لطفا با ما تماس بگیرید: [email protected]