کنترل کیفیت و کاربردهای پروتئین های نوترکیب

کنترل کیفیت پروتئین های نوترکیب برای قابلیت اطمینان و تکرارپذیری داده های تجربی بسیار مهم است. هر مرحله، از طراحی پروژه تا فرآیند تولید، نیازمند استراتژی‌های کنترل کیفیت دقیق است.

استراتژی های کنترل کیفیت

بخش صنعتی از رویه‌های عملیاتی استاندارد سختگیرانه پیروی می‌کند، در حالی که جامعه دانشگاهی باید دانش حرفه‌ای را برای بهبود تکرارپذیری داده‌ها افزایش دهد. پروتئین هایی با کاربردهای بیولوژیکی خاص یا ویژگی های بیوشیمیایی نیاز به استراتژی های کنترل کیفیت (QC) مناسب دارند.

مثال ها و راه حل های چالش برانگیز

Yaohai Bio-Pharma دارای تجربه گسترده ای در تولید و خالص سازی پروتئین نوترکیب، همراه با تیمی از متخصصان است که تضمین می کند که تولید پروتئین شما با خلوص بالا تکمیل می شود. Yaohai با استفاده از تجربه ما از صدها پروژه، نحوه بهینه سازی تصفیه پروتئین را خلاصه می کند.

پروتئین های اتصال دهنده به اسید نوکلئیک: مراحل حذف نوکلئیک اسید، مانند نوکلئازها یا رسوب PEI، ضروری است. نسبت A260nm/A280nm برای تشخیص آلودگی اسید نوکلئیک نظارت می شود.

ماوس Ferritin Heavy Chain 1 برای Cryo-EM: مراحل تصفیه باید بهینه شوند و نوکلئازها باید برای کاهش نسبت A260nm/A280nm و اطمینان از خلوص پروتئین اضافه شوند.

پروتئین کایمریک انسان dsRBEC: لیز سلولی از یک بافر حاوی اوره استفاده می کند و به دنبال آن تا کردن مجدد روی ستون برای به دست آوردن پروتئین های فعال عملکردی انجام می شود.

پروتئین های اتصال دهنده کاتیون های دو ظرفیتی: کاتیون های دو ظرفیتی خاص باید در طول بیان و خالص سازی اضافه شوند و از عوامل کیلیت اجتناب شود.

پروتئین های آهن-گوگرد: برای جلوگیری از اختلال در خوشه [2Fe ± 2S]، و اطمینان از تاخوردگی و عملکرد صحیح پروتئین، باید از ایمیدازول اجتناب شود.

قطعه محلول LLT1: طراحی جهش یافته تشکیل پیوند دی سولفیدی و تاخوردگی پروتئین را بهینه می کند و در نتیجه پروتئین های پایدار و با بازده بالا ایجاد می کند.

کریستالیزاسیون کیناز CLK1: بیان همزمان با λ-فسفاتاز فسفات ها را از محل های فسفوریلاسیون حذف می کند و کروماتوگرافی حذف اندازه (SEC) و کروماتوگرافی تبادل آنیون برای به دست آوردن CLK1 همگن بدون فسفوریلاسیون ناهمگن استفاده می شود.

پروتئین برای استفاده از آنتی ژن: ارزیابی خلوص برای جلوگیری از آلودگی با پروتئین های بسیار ایمنی زا ضروری است. برای آنتی بادی های اپی توپ ساختاری، ترکیب سه بعدی آنتی ژن باید حفظ شود.

پروتئین های مستعد تجمع: استراتژی‌هایی مانند غربالگری سویه‌های مختلف و کاهش دمای کشت برای محدود کردن مسائل مربوط به تجمع به کار گرفته می‌شوند و استراتژی‌های تصفیه سریع طراحی می‌شوند.

حذف اندوتوکسین: روش‌هایی مانند کروماتوگرافی بار مثبت و کروماتوگرافی میل ترکیبی لیگاند پلی‌کاتیون، اندوتوکسین‌ها را حذف می‌کنند و اطمینان می‌دهند که سطح LPS کمتر از حد مجاز است.

مجتمع های پروتئینی: زیرواحدها به طور جداگانه بیان می شوند و در شرایط آزمایشگاهی مونتاژ می شوند یا به طور همزمان بیان می شوند تا کمپلکس های عملکردی را تشکیل دهند. یکپارچگی کمپلکس با همگنی و جرم مولی ارزیابی می شود.

نتیجه

تولید پروتئین با طراحی استراتژیک با در نظر گرفتن صفات و کاربردهای بیوشیمیایی شروع می شود. در طول بیان، خالص‌سازی و QC، شرایط و روش‌ها برای پایداری، عدم تجمع و حالت طبیعی بهینه می‌شوند. پروتئین های تصفیه شده کاربردهای مختلف پایین دستی مانند خصوصیات بیوفیزیکی دارند.

Yaohai Bio-Pharma نیز فعالانه به دنبال شرکای سازمانی یا فردی جهانی است و رقابتی ترین غرامت را در صنعت ارائه می دهد. اگر سوالی دارید، لطفا با ما تماس بگیرید: [email protected]