پلاسمید: یک مولکول DNA دایره ای کوچک با پتانسیل بزرگ

پلاسمیدها، مولکول‌های کوچک دایره‌ای DNA، به عنوان بردارهای ضروری برای نوترکیب DNA در تحقیقات زیست‌شناسی مولکولی و ژن درمانی عمل می‌کنند. عملکرد و کیفیت پلاسمیدها بسیار مهم است، با نسبت ابرپیچ‌پیچ و محتوای اندوتوکسین دو عامل مهم تأثیرگذار بر کیفیت پلاسمید هستند.

زیرگروه های پلاسمید

پلاسمیدهای استخراج شده از اشریشیا کلی (E. coli) در زیرگروه های مختلفی وجود دارند: شکل های ابرپیچ (SC)، دایره ای باز (OC) و خطی (L) (شکل 1). در میان آنها، پلاسمیدهای ابرپیچ دار پایداری، آنتی ژنی عالی و کارایی انتقال و بیان بالا را نشان می دهند.

شکل 1. نمودار شماتیک زیرگروه های معمول پلاسمید

در الکتروفورز ژل آگارز DNA پلاسمید، ترتیب سرعت مهاجرت DNA ابرپیچ، DNA خطی و DNA دایره ای باز است (شکل 2).

شکل 2. الگوی مهاجرت الکتروفورز ژل آگارز از انواع مختلف پلاسمید

Yaohai Bio-Pharma به طور مداوم فرآیندها و تکنیک های خود را بهبود بخشیده است تا اطمینان حاصل کند که نسبت ابرپیچ پلاسمیدهای درجه ترانسفکشن ≥85٪ و پلاسمیدهای درجه تحقیقاتی ≥50٪ است. در زیر یک نمونه موردی است (شکل 3)، که در آن الکتروفورز ژل آگارز با نرم افزار Gel-Pro Analyzer ترکیب می شود تا نسبت ابرپیچ شده را تشخیص دهد.

شکل 3. نتایج بازرسی کیفیت نسبت ابرپیچ پلاسمید

اندوتوکسین

اندوتوکسین، جزئی از دیواره سلولی باکتری های گرم منفی، عمدتاً از لیپوپلی ساکارید A (LPS-A) به عنوان جزء سمی آن تشکیل شده است. در طول استخراج پلاسمید، اندوتوکسین در محلول لیز آزاد می شود که به شدت بر کارایی انتقال پلاسمید به سلول ها تأثیر می گذارد. علاوه بر این، می‌تواند پاسخ‌های ایمنی غیراختصاصی را در سلول‌ها فعال کند که منجر به نتایج مثبت کاذب در آزمایش‌ها می‌شود.

Yaohai Bio-Pharma یک رویکرد "غیر مقدماتی" و "حذف بالا" را اتخاذ می کند و به شدت استفاده از معرف ها و مواد حاوی اندوتوکسین را در طول فرآیند تصفیه کنترل می کند. این شرکت همچنین یک روش کارآمد حذف اندوتوکسین را توسعه داده است که سه سطح محتوای اندوتوکسین را ارائه می دهد: ≤0.1 EU/μg، ≤0.01 EU/μg و ≤0.005 EU/μg.

Yaohai Bio-Pharma دارای یک خط خدمات استخراج پلاسمید با کارایی بالا است که می تواند 1 میلی گرم از پلاسمیدهای استخراج شده را در یک هفته تحویل دهد. به طور پیش فرض، بیش از هفت تست کنترل کیفیت (QC) را برای اطمینان از تحویل پلاسمیدهای با کیفیت بالا و استاندارد از منظرهای مختلف ارائه می دهد.

ما همچنین به طور فعال به دنبال شرکای جهانی نهادی یا فردی هستیم. ما رقابتی ترین پاداش را در صنعت ارائه می دهیم. اگر سوالی دارید، لطفا با ما تماس بگیرید: [email protected]