بهینه‌سازی فرآیند تصفیه برای انسولین انسانی بازتولیدی

در سالهای اخیر، رشد بیماران دیابت منجر به افزایش تقاضا برای انسولین شده است، اما انسولین قابل دسترس با تأمین کوتاه مواجه است. تولید انسولین کارآمد و اقتصادی حیاتی است. انسولین عمدتاً از طریق اشتریکولیا (E. coli) و قارچ صاف تولید می‌شود زیرا رشد سریع و هزینه پایینی دارند، اما E. coli با فرآیندهای پیچیده پس‌ازبرون مواجه است.

بازدید از فرآیند پس‌ازبرون:

پاک‌سازی انسولین انسانی بازسازی‌شده از بدنهای شامل E. coli شامل چندین مرحله است، از جمله بازیابی، شستشو، محلول‌سازی و اکسیداسیون، قطع، تعویض بافر، پاک‌سازی کروماتوگرافی، تراشیدگی، بازتولد، قطع انزیمی و فرمولاسیون.

شرکت Yaohai Bio-Pharma دارای تجربه گسترده در تولید و پاک‌سازی انسولین بازسازی‌شده است و همراه با تیمی از کارشناسان، اطمینان می‌رساند که تولید انسولین شما با کارایی بالا انجام شود. با استفاده از تجربه‌های ما از صد ها پروژه، Yaohai به محض خلاصه‌ای از نحوه بهینه‌سازی فرآیند پاک‌سازی پس‌ازبرون برای انسولین انسانی بازسازی‌شده ارائه می‌دهد.

بازیابی و شستشوی بدن شامل:

سلول‌ها با استفاده از روش‌های مکانیکی (مانند اولتراسونیک، همگن‌سازی فشار بالا) یا درمان با لیزوزoom معطوف می‌شوند، سپس بافرهای شستشو (حاوی یورئا، تریتون X-100، و غیره) برای حذف آلودگی‌ها استفاده می‌شود. در طی شستشو، پارامترها نیاز به بهینه‌سازی دارند تا کیفیت پروتئین را تضمین کرده و هزینه‌ها را تحت کنترل بگیرند.

محلول‌سازی و اکسیداسیون بدن شامل:

استفاده از جداسازهای غلظت بالا (مانند گوآنیدین هیدروکلرید و یورئا) برای محلول‌سازی بدنهای شامل است، با افزودن دیتیوتراїتول یا β-مرکاپتواتanol برای جلوگیری از تشکیل پیوندهای دی‌سولفید نادرست. pH و دما به طور قابل توجهی بر واکنش‌های محلول‌سازی و اکسیداسیون تأثیر می‌گذارند.

بریدگی و تعویض بافر:

استفاده از شکستگی سیانوژن برومید برای حذف امینو اسید آغاز کننده نهایی N، اما این روش مسائل مربوط به سمیت و کم بودن ویژگی دارد. تبادل بافر از طریق دیالیز، اولترافیلتراسیون یا کروماتوگرافی جداسازی بر اساس اندازه، مواد شیمیایی مضر را حذف می‌کند تا پیش از عملیات‌های بعدی آماده شود.

پاک‌سازی کروماتوگرافی و تراشیدگی:

چندین تکنیک کروماتوگرافی برای پاک‌سازی انسولین استفاده می‌شود، شامل کروماتوگرافی وصالی، کروماتوگرافی تعویض یون، کروماتوگرافی فاز معکوس، کروماتوگرافی تعامل هیدروفوبیک و کروماتوگرافی جداسازی بر اساس اندازه. روش‌های تراشیدگی، مانند تراشیدگی pH و بلور کردن با روی، برای حذف آلودگی‌ها و غلظت دادن به پروتئین‌ها استفاده می‌شود.

بازتعریف:

پروتئین محلول شده در یک بافر بازتعریف ت Verdil می‌شود تا تشکیل صحیح پیوندهای دی‌سلفید و پیچیدگی پروتئین را تقویت کند. کروماتوگرافی مایع پیچیدگی پروتئین و دیالیز نیز روش‌هایی هستند که برای بازتعریف استفاده می‌شوند.

تراشیدگی انزیمی و فرمولاسیون:

تریپسین و کاربوکسیپپتیداز B برای شکستن پپتید C استفاده می‌شوند، که منجر به تشکیل هترودیمر انسولین فعال می‌شود. در نهایت، بلورکردن و لیوفیلیزاسیون برای حذف نمک‌های باقیمانده و بافرها استفاده می‌شود تا یک فرمولاسیون پایدار آماده شود. افزودنی‌های خاص (مانند روی و پروتامین) برای برآورده کردن نیازهای بالینی مختلف اضافه می‌شوند.

نتیجه گیری:

پردازش پس از بیوتکنولوژی انسولین از ای. کلی پیچیده است. تمرکز آینده باید بر بهینه‌سازی این مراحل برای تولید کارآمد و اقتصادی باشد تا نیازها را برآورده کرده و هزینه‌ها را کاهش دهد.

شرکت Yaohai Bio-Pharma نیز به طور فعال در حال جستجوی همکاران سازمانی یا فردی در سطح جهانی است و کمپنسیشن رقابتی‌ترین صنعت را ارائه می‌دهد. اگر سوالی دارید، لطفاً آزادانه با ما تماس بگیرید: [email protected]