امروزه Yaohai برای به اشتراک گذاشتن پروتکل رونوشت in vitro خود برای RNA طولانی بسیار هیجان انگیز است. این یک استراتژی موثر است که دانشمندان اغلب برای تولید RNA در آزمایشگاه از آن استفاده می کنند. به این ترتیب محققان می توانند تعداد قابل توجهی RNA طولانی تولید کنند - چیزی که برای مطالعه در زمینه های مختلف بیولوژیکی ضروری است. در اینجا، ما یک راهنمای گام به گام برای تهیه RNA های طولانی از طریق رونویسی in vitro ارائه می دهیم. ما همچنین در مورد اینکه چگونه میتوانیم این فرآیند را بهتر کنیم صحبت خواهیم کرد و سعی میکنیم برخی از مشکلاتی که در سنتز RNA طولانی با آن مواجه هستید را برطرف کنیم.
چندین جزء ضروری برای رونویسی In vitro، به ویژه RNA طولانی، مورد نیاز است. شما باید آنزیمی به نام RNA پلیمراز، مواد نوشتاری به شکل نوکلئوتید تری فسفات (NTPs)، بافری برای کمک به واکنش و مقداری الگوی DNA تهیه کنید. چگونه این کار را مرحله به مرحله انجام دهید، می توانید یک راهنمای دقیق را در اینجا بیابید:
عوامل متعددی برای عملکرد خوب سنتز RNA بسیار مهم هستند. مهمتر از همه، مقدار یون منیزیم در خود بافر مهم است. RNA پلیمراز به مقدار قابل توجهی منیزیم برای پشتیبانی از تعامل مناسب با الگوی DNA و تا شدن بعدی RNA نیاز دارد. دومین جنبه مهمی که باید در نظر گرفت غلظت الگوی DNA است. به طور خاص، شما باید به اندازه کافی واکنش DNA الگو داشته باشید تا بتوانید بازده RNA خوبی داشته باشید.
البته RNA طولانی با مجموعه ای از مسائل خاص خود همراه خواهد بود. اینکه این مشکلات می توانند به تجزیه RNA مربوط شوند، بر نحوه چین خوردگی RNA و ساخت ساختارهایی که به طور بالقوه در سنتز RNA تداخل دارند، تأثیر می گذارد. یکی از راههای مقابله با این چالشها، دستکاری بافری است که میگیرید. برای ساختار جامعتر RNA، محققان میتوانند مواد شیمیایی ویژهای مانند DTT و p-mercaptoethanol اضافه کنند تا به RNA به درستی تا شدن و جلوگیری از چسبیدن آن به هم یا کلوخه شدن آن کمک کنند.
علاوه بر این، همه انواع RNA طولانی شبیه هم نیستند و برخی ممکن است به روشهای سنتز جایگزین نیاز داشته باشند. ویژگیهای خاصی وجود دارد که محققان ممکن است نیاز به اضافه کردن آنها به RNA داشته باشند، مانند افزودن کلاهک 5 یا دم Poly-A. اگر این مورد نیاز باشد (همانطور که بعدا توضیح داده شد)، محققان باید آنزیمهای دیگری مانند Guanylyltransferase و Poly(A)Polymerase را نیز بگنجانند. همچنین باید یک آنزیم RNA پلیمراز مناسب را انتخاب کرد که به طور طبیعی آنها را قادر می سازد RNA بیشتری تولید کنند. به محض اینکه RNA طولانی باید سنتز شود، باید بهترین شرایط را شناسایی کنیم.
RNA های طولانی در رونوشت آزمایشگاهی تعدادی از کاربردهای کلیدی برای پروتکل رونوشت RNA طولانی در شرایط آزمایشگاهی در چندین تحقیق، سنجش و تلاش های درمانی وجود دارد. این به دانشمندان کمک می کند تا ساختار RNA، نحوه عملکرد آن و اینکه چگونه می توانند ژن ها را با فناوری های معاصر تغییر دهند، درک کنند. روزهای دیگر - کشف بیماریهای مختلف و درمانهای آنها مانند درمانهای RNA بسیار رایج - اجازه دهید باور کنیم که این مطالعه در فناوری چقدر میتواند برای پزشکی مفید باشد.
استفاده از این پروتکل مزایای زیادی دارد. روش مبتنی بر الکتروفورز به طور کلی کارآمدترین و مقرون به صرفه ترین روش برای تولید مقادیر زیادی RNA طولانی است. گذشته از کیفیت RNA، بازده خوب نیز عامل مهمی برای محققان است تا به آنها در تحقیقاتشان کمک کند، به ویژه اگر به دلیل مواد ورودی بالا برای شروع به مقادیر زیادی RNA برای آزمایش نیاز داشته باشند. علاوه بر این، رونویسی در شرایط آزمایشگاهی برای RNA طولانی معمولاً دقیقتر و قابل تکرارتر از سنتز شیمیایی یا سنتز سلولی RNA است.
Yaohai BioPharma یک CDMO میکروبی برتر 10 است که پروتکل رونوشت In vitro برای Long RNA و همچنین امور نظارتی را در خود جای داده است. ما یک سیستم مدیریت کیفیت داریم که مطابق با استانداردهای فعلی GMP و همچنین مقررات جهانی است. تیم کارشناسان نظارتی ما در چارچوب های نظارتی جهانی برای تسریع راه اندازی بیولوژیکی مهارت دارند. ما از فرآیندهای تولید قابل ردیابی محصولات با کیفیت و همچنین مطابق با قوانین FDA ایالات متحده و EMA اتحادیه اروپا اطمینان می دهیم. استرالیا TGA و چین NMPA نیز راضی هستند. Yaohai BioPharma با موفقیت ممیزی را در محل افراد واجد شرایط اتحادیه اروپا (QP) برای سیستم کیفیت GMP و همچنین تأسیسات تولید ما گذرانده است. علاوه بر این، ما اولین ممیزی های گواهینامه سیستم مدیریت کیفیت ISO9001، سیستم مدیریت زیست محیطی ISO14001 و سیستم مدیریت ایمنی و بهداشت شغلی ISO45001 را تایید کرده ایم.
Yaohai Bio-Pharma، 10 تولیدکننده برتر محصولات بیولوژیکی، متخصص تخمیر میکروبی است. ما یک مرکز پیشرفته ایجاد کردهایم که مجهز به امکانات مدرن و قابلیتهای قوی تولید RD است. ما پنج خط تولید مواد دارویی داریم که با الزامات GMP برای تخمیر و خالص سازی میکروبی مطابقت دارند، و همچنین دو خط پایان پرکننده که برای کارتریج ها، ویال ها و همچنین سرنگ های از پیش پر شده خودکار هستند. مقیاس های تخمیر موجود از 100 لیتر تا 500 لیتر، 1000 لیتر و 2000 لیتر متغیر است. پروتکل رونوشت آزمایشگاهی برای Long RNA برای vias 1 تا 25 میلی لیتر است، در حالی که مشخصات سرنگ های از پیش پر شده و پر کردن کارتریج 1-3 میلی لیتر را پوشش می دهد. کارگاه تولید ما با cGMP سازگار است و عرضه ثابت نمونه های بالینی و همچنین اقلام تجاری را تضمین می کند. کارخانه ما مولکول های بزرگی تولید می کند که به کره زمین ارسال می شود.
Yaohai Bio-Pharma در تولید مواد بیولوژیکی که از میکروارگانیسم ها ایجاد می شوند، تجربه دارد. ما راه حل های سفارشی RD و همچنین خدمات تولیدی را ارائه می دهیم در حالی که خطرات احتمالی را به حداقل می رسانیم. ما با تکنیکهای متنوعی مانند زیر واحدهای سلولی نوترکیب، واکسنها (شامل پپتیدها)، فاکتورهای رشد، هورمونها و پروتکل رونوشت آزمایشگاهی برای RNA طولانی کار کردهایم. ما متخصص بسیاری از میکروارگانیسمها مانند ترشح خارج سلولی و درون سلولی مخمر (بازدهی تا 15 گرم در لیتر) و باکتریهای محلول در داخل سلولی و داخل بدن (بازدهی تا 10 گرم در لیتر) هستیم. ما همچنین یک پلت فرم تخمیر BSL-2 را برای ایجاد واکسن های باکتریایی توسعه داده ایم. ما سابقه بهبود فرآیندهای تولید و در نتیجه افزایش بازده و کاهش هزینه ها را داریم. ما یک تیم فناوری بسیار کارآمد برای اطمینان از تحویل به موقع و با کیفیت بالا پروژه ها داریم. این به ما کمک می کند محصولات شما را که منحصر به فرد هستند سریعتر وارد بازار کنیم.
Yaohai Bio-Pharma پیشرو در پروتکل رونوشت In vitro برای CDMO طولانی RNA است. تمرکز اصلی ما تولید واکسن های میکروبی و درمانی برای درمان حیوانات خانگی، سلامت انسان و دامپزشکی بوده است. ما دارای پلتفرمهای پیشرفته RD و فناوری تولید هستیم که کل فرآیند تولید از مهندسی سویههای میکروبی گرفته تا پردازش بانک سلولی و طراحی روش تا تولید بالینی و تجاری را پوشش میدهد و اطمینان حاصل میکند که میتوانیم از تحویل موفقیتآمیز پیشرفتهترین راهحلها اطمینان حاصل کنیم. . ما مقدار زیادی دانش در زمینه میکروبی پردازش زیستی جمع آوری کرده ایم. بیش از 200 پروژه با موفقیت تکمیل شده است و ما به مشتریان خود کمک می کنیم تا از مقرراتی مانند FDA ایالات متحده و همچنین اتحادیه اروپا EMA پیروی کنند. ما همچنین به آنها کمک می کنیم تا TGA استرالیا و NMPA چین را هدایت کنند. ما به دلیل تجربه و تخصص خود قادر به پاسخگویی سریع به نیازهای بازار و ارائه خدمات CDMO سفارشی هستیم.