eGFP reporteri RNA optimaalse annuse avalikustamine

Molekulaarbioloogias ja biotehnoloogias on täiustatud roheline fluorestsentsvalk (eGFP) kujunenud pöördeliseks reportergeeniks tänu selle võimele tekitada erkrohelist fluorestsentsi lainepikkusel 509 nm. See algselt meduusist Aequorea victoria eraldatud valk on imetajate rakukultuurides otsene tuvastamismarker, mis hõlbustab transfektsiooni efektiivsuse jälgimist ja optimeerimist. Siiski tekib küsimus: milline on eGFP reporter-RNA optimaalne annus soovitud ekspressioonitaseme saavutamiseks?

Uuringud on näidanud, et eGFP reporter-RNA efektiivsus sõltub suuresti selle annusest, eriti tsirkulaarse RNA (circRNA) ja isevõimendavate mRNA (saRNA) süsteemide kontekstis. Genti ülikooli nanomeditsiini uurimisrühma Katrien Remauti meeskonna poolt läbi viidud uuringud on toonud esile keerulise seose saRNA annuse ja selle translatsiooni efektiivsuse vahel võrkkesta rakkudes. Nad avastasid, et saRNA väikesed annused, mis jäävad alla kaasasündinud immuunaktivatsiooni läve, hõlbustavad tõhusat valgu ekspressiooni. See rõhutab täpse annusekontrolli tähtsust eGFP reporter-RNA täieliku potentsiaali ärakasutamisel.

Praktilistes rakendustes võivad eGFP mRNA tavaliselt kasutatavad kontsentratsioonid ulatuda mikrogrammist (μg) kuni nanogrammini mikroliitri kohta (ng/μL). Näiteks on transfektsioonikatsetes näidatud, et eGFP mRNA annused vahemikus 0.05, 0.5 μg kuni 99, 100 μg annavad erinevates rakutüüpides märkimisväärse ekspressioonitaseme, kusjuures positiivsete rakkude protsent ulatub teatud juhtudel 0.1–XNUMX% -ni. Eelkõige näitab saRNA annustes alla XNUMX, XNUMX μg parema ekspressioonitaseme võrreldes lineaarse mRNA-ga, näidates selle isevõimendavat eelist.

eGFP reporter-RNA mitmekülgsus ei seisne mitte ainult selle eredas ja stabiilses fluorestsentsis, vaid ka selle kohanemisvõimes erinevate eksperimentaalsete seadistustega. Teadlased saavad annust täpselt kohandada vastavalt oma konkreetsetele vajadustele, tagades täpse kontrolli geeniekspressiooni tasemete üle. See funktsioon muudab eGFP hindamatuks tööriistaks geenifunktsiooni uurimiseks, rakkude saatuse jälgimiseks ja transfektsiooniprotokollide optimeerimiseks.

Kokkuvõtteks võib öelda, et eGFP reporter-RNA optimaalne annus sõltub suuresti katse kontekstist ja soovitud tulemustest. Valides hoolikalt sobiva annuse, saavad teadlased ära kasutada selle mitmekülgse reportergeeni kogu potentsiaali, edendades meie arusaamist molekulaarsetest mehhanismidest ja edendades biotehnoloogia innovatsiooni.

Yaohai Bio-Pharma on esimene ja suurim bioloogiline ravim, mis on pühendatud mikroobide ekspressioonisüsteemile CRDMO Suur-Hiinas. Oleme pühendunud oma ülemaailmsete klientide kliiniliste ja äriliste vajaduste rahuldamisele inim- ja veterinaarravimite bioloogiliste ravimite, vaktsiinide ja diagnostika osas.

Otsime aktiivselt ka institutsionaalseid või individuaalseid globaalseid partnereid. Pakume valdkonna kõige konkurentsivõimelisemat tasu. Kui teil on küsimusi, võtke meiega julgelt ühendust: [email protected]