mRNA sünteesitakse in vitro transkriptsiooni (IVT) teel lineariseeritud plasmiidsest DNA-st (pDNA). IVT protseduuri käigus moodustuvad ka mõned kõrvalsaadused, sealhulgas kaheahelaline RNA (dsRNA), mis on identifitseeritud kaasasündinud immuunraja peamiste käivitajatena. Oluline on eemaldada lisandid ja saada kõrge saagis puhas mRNA in vitro/vivo mRNA uuringute ja terapeutiliste rakenduste jaoks.
Yaohai Bio-Pharma on loonud mRNA sünteesi tehnoloogiate komplekti väga puhas mRNA, nagu järjestuse kujundamine ja optimeerimine, IVT, puhastamine, lüofiliseerimine ja lipiidide nanoosakeste (LNP) kapseldamine. Kõik tooted vabastatakse rangete kvaliteedikontrolli standardite alusel. Afiinsuskromatograafia (AC), mis põhineb tugeval ja selektiivsel interaktsioonil mRNA 3' polüA saba ja statsionaarse faasi oligo dT vahel, on tõhus ja skaleeritav mRNA puhastusstrateegia.
Saavutused
| Toode |
Kohandatud väga puhas mRNA
|
| Pikkus |
100-10,000 XNUMX nukleotiidi |
| RNA sisu |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Puhtus |
A260 / A280 |
| Tuvastage ja puhtus |
Agaroosgeeli elektroforees (AGE)
Kapillaarelektroforees (CE)
|
| Fikseeritud |
RNaasi vaba vesi (vedel) |
| Transport TASUTA |
Laev kuiva jääga; või ümbritseva õhu temperatuuril |
| Säilitamine |
● Vedel, temperatuuril -20°C või alla selle
● Lüofiliseeritud pulber, temperatuuril 4 °C
|
| taotlus |
LNP koostise väljatöötamine,
Rakupõhised testid, loomkatse
|
Muud kohandatavad valikud
| 5' Cap |
● Korkimata
● Cap0, kaaskork
● Cap1, kaaskork
● Cap1, ensümaatiline piiramine
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Looduse UTR järjestus
● Mutant/konstrueeritud UTR järjestus
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A saba (soovitatav)
● Segmenteeritud polüA saba
● Muu kohandatud saba
|
| Modifitseeritud nukleosiidid |
● Modifitseerimata alused,
● pseudouridiin (Ψ),
● N1-metüülseudouridiin (N1Ψ),
● 5-metüültsütosiin (m5C),
● 5-metüüluridiin (m5U),
● 5-metoksüuridiin (5 mU),
● 2-tiouridiin (s2U),
● 2'-O-metüül-U
● teised
|
Juhtumiuuring
Töötasime välja mitmeastmelise kromatograafia puhastusprotsessi ja valmistasime kõrge puhtuse ja terviklikkusega (> 95%) mRNA.
Joonis. Kõrge puhtusastmega mRNA (＞98%) analüüs
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
