Bakteriaalsete IB-de kasutamine rekombinantse valgu tootmiseks

Bakteriaalsed inklusioonkehad (IB-d) rekombinantse valgu tootmisel pakuvad lihtsat eraldamist, stabiilsust, kõrget ekspressiooni- ja lagunemiskindlust ning võivad ekspresseerida bioloogilise aktiivsusega toksilisi valke. IB mõistmise edusammud avavad töötlemiseks uusi võimalusi koos väljakutsete ja lahendustega tulevaste uuringute jaoks.

Yaohai Bio-Pharmal on enam kui 10-aastane kogemus rekombinantsete valkude tootmisel mikroobsete fermentatsioonisüsteemide abil. Meie tugev ja professionaalne ekspertide meeskond garanteerib, et puhastatud ümbervolditud valk võib ulatuda 1.5 g/l.

IB-de töötlemise strateegiad ja väljakutsed

IB-de eraldamine IB eraldamise meetodid sõltuvad valgu struktuurist-funktsioonist ja rakendusvajadustest. Füüsilised meetodid rikuvad rakke, kuid võivad kahjustada valgu kvaliteeti. Ensümaatilised meetodid parandavad puhtust, kuid on kulukad. Õrnad pesuvahendid sobivad klassikaliste IB-de, mitte mitteklassikaliste pesuvahendite jaoks. pH kontroll on lahustuvuse seisukohalt ülioluline. Elektroforeesi sadestamine on lihtne, kuid bioloogiliselt aktiivsete valkude jaoks mitte skaleeritav.

IB-de lahustumine IB-de lahustumine on aktiivsete valkude taastamiseks ülioluline. Tugevad denaturaatorid kahjustavad looduslikku struktuuri, samas kui mittedenatureerivad ained ei sobi klassikaliste IB-de jaoks. Õrnad solubilisaatorid võivad lahustada IB-sid, kaitstes samal ajal valgu struktuuri, kuid mitte kõiki valke. Edasine töö vajab solubilisaatorite valimiseks paremaid algoritme.

Renaturatsioonistrateegiad Valkude renatureerimine on funktsionaalsuse jaoks ülioluline. In vitro renatureerimine seisab silmitsi väljakutsetega. Solubilisaatori valik, valgu kontsentratsioon, tingimused ja meetodid mõjutavad tulemust. Õrnad solubilisaatorid kaitsevad loomulikku struktuuri ja parandavad kvaliteeti. Mõõdukas kontsentratsioon ja optimeeritud tingimused vähendavad agregatsiooni. Monoliitsete maatriksitega kolonnipõhised meetodid pakuvad suuremat puhtust ja saagist.

Renatureeritud valkude puhastamine Edasine puhastamine eraldab valesti volditud valkudest õigesti kokkuvolditud valgud. Traditsiooniline kromatograafia võitleb sarnaste valkudega. Alternatiivsed meetodid pakuvad eeliseid, kuid nõuavad sihtvalgu spetsiifilist valikut. Universaalse puhastusmeetodi väljatöötamine on endiselt väljakutse.

Järeldus

IB-d pakuvad eeliseid rekombinantse valgu tootmisel, kuid tekitavad töötlemisega seotud väljakutseid. Tänu IB-de valgu struktuuri-funktsiooni sügavamale mõistmisele ja edusammudele eraldamisel, solubiliseerimisel, renatureerimisel ja puhastamisel võib peagi saavutada aktiivsete valkude suure läbilaskevõimega taastumise. See vähendab kulusid ja kiirendab biofarmatseutilist uurimis- ja arendustegevust, mis soodustab tööstuse kasvu.

Yaohai Bio-Pharma otsib aktiivselt ka institutsionaalseid või individuaalseid ülemaailmseid partnereid ja pakub sektoris kõige konkurentsivõimelisemat tasu. Kui teil on küsimusi, võtke meiega julgelt ühendust: [email protected]

Yaohai Bio-Pharma kohta lisateabe saamiseks vaadake palun veebisaiti: www.yaohaibio-pharma.com