Geeniteraapia areng: uued DNA-tüübid ja optimeerimine

DNA rakenduste valdkonnas on plasmidiline DNA (pDNA) alati olnud eriti populaarne oma erilise stabiilsuse, lihtsa tootmise, salvestamise ja transpordi tõttu. Kuid teaduslike uurimuste edenemise kaasaegses, on uute DNA tüüpide, nagu Minicircle DNA (mcDNA), Doggybone DNA (dbDNA) ja Close-Ended DNA (ceDNA), allikas avanenud geneeteeriumi ja muude tippvaldkondade jaoks uusi võimalusi.

mcDNA

mcDNA tuleneb vanemplasmiidide rekombinatsiooniprotsessist, kus on eemaldatud bakteriaelementid samal ajal, kui säilitatakse ringjooneline struktuur. Selle ettevalmistamisprotsess sõltub spetsiifilistest enzyymiaktivitest, näiteks φC31 integrast, saavutades nii suurema rekombinatsioonefektiivsuse. McDNA oluline omadus on selle puudumine bakteriasekventidest, mis võimaldab sellele sõltuda väiksematest DNA jooksutajatest ning seeläbi parandada geneetilist väljendamist.

dbDNA

dbDNA võib omada sulgetud topeltahelise koonfiguratsiooni, milles on mõlematel poolel väiksed ühekordsete ahelate luupid ja see on täielikult vabastatud bakteriaalsest materjalist ja antibiotikumi-resistentsusest pärinevatest geendest. Selle väiksem suurus võimaldab lihtsamalt selle toimetamist rakudesse ja kehadesse ning see näitab täielikku nukleasi resistentset. dbDNA algne vorm sisaldab ainult geneetilise väljenduse jaoks vajalikke elemente, jättes ära vajaloomata järjed, mistõttu see omab tugeva geneetransfektsioonivõimega ja kõrgema proteiini väljendusetaseme.

ceDNA

ceDNA on tehnoloogiliselt muundatud kaksikjuhtmeeline, lineaarne, kovalentsesti sulgenud DNA-konstruktsioon, mis sisaldab sihtmolekulit ja teisi avaldamise reguleerivaid elemendeid. Selle lõpped on pööratud terminalsete korduste (ITR) kujul, mis võimaldavad konstruktsioonidel olla tuhandeid baase, mis ulatuvad kaugelt traditsiooniliste adeno-assotsiieeritud viiruse (AAV) vektorite piiridesse välja. ceDNA ITR-struktuur on oluline tuumasse sisenemiseks ning selle avaldamismuster on üksteisele vastav episoomidena funktsioneeriva DNA-ga. Lisaks on ceDNA ettevalmistamismeetod kiire ja majanduslik, mis teeb selle sobivaks geneeterapiu uurimiseks haruldaste haiguste, vaktsiinide ja rakkohaiguste valdkondades.

DNA optimeerimine

DNA optimeerimise osas parandavad uurijad transgeensete geenide väljendamist, optimeerides plasmid-DNA sisemisi komponente. Samal ajal asendatakse valikumärke, näiteks ampicilliini asendamine kanamütiniga, et vähendada autoimmuunseid ohtu. Lisaks kasutatakse ka sukroosivalikusüsteemi traditsiooniliste valikumärkide asendamiseks. Koodoni optimeerimise osas parandavad uurijad proteiini väljendamistasemeid, muutes koodonikasutust ja võttes täielikult arvesse geneesekvenci väljendamiseks põhjust hosti eelistusi. Optimeerimisprotsessi käigus peavad uurijad silmas ka koodonipööratust, mRNA teine struktuuri stabiilsust, trans-vaatelementide ja piiriväärtuste vältimist ning GC-sisalduse tasakaalu.

Kokkuvõttes on uute DNA tüüpide arendamine ja DNA optimeerimine andnud uusi võimalusi ja väljakutseid valdkondades, nagu geeniteraapia. Yaohai Bio-Pharma on loonud GMP tootmisplaatvorme nii ringjoonsetele kui ka lineariseeritud plasmiditele. Yaohail võib pakkuda erinevate DNA tüüpide protsessi arendamist ja optimeerimist, sealhulgas neid uusi DNA tüüpe, rahuldades klientide erinevaid vajadusi.

Yaohai Bio-Pharma otsib ka aktiivselt globaalseid partnerite institutsioonide või isikute naftas ning pakub tööstuses kõige konkurentsivõimsemaid tasusid. Kui teil on midagi küsimusi, siis ÄRGE HESITATE meiega ühendust võtta: [email protected]