Esindaja RNA muundluste meetodite edendamine

Kui mõtleb, milline reporteri mRNA muunduste meetod on eelistatav, siis kindlat vastust ei ole, kuna iga meetod ja igal reporteri geelil on oma eelised ja rakendusjuhud. Siin on mõned tavalised mRNA muunduste meetodid ja reporteri geenid koos nende omadustega ja sobivusega.

mRNA Muundamismeetodid

Metüülneerimine:

1. m6A : Seotud mRNA stabiilsuse, spetsiatsiooni, tõlkimise ja miRNA töötlemisega. Tuvastamise väljakutseteks kuuluvad antikeha valik ja asukoha tuvastamine.
2. 5' Kap Nm : Suurendab stabiilsust, spetsiatsiooni, polüadenüülirovana ja tuumaku ekspordi. Aitab eristada ise-RNA vahelise RNA-st.
3. Pseudouriidüüleerimine : Muudab kodoneid, suurendab stabiilsust ja reageerib stressile. Katalüüseeritakse pseudouriidüüli süntesaatorite poolt.

Mittelooduslike nukleotiidide kasutamine:

1. Esitatud transkriptsiooni ajal kahekaalu keemilise muunduste strateegiaga. See suurendab stabiilsust, tõhusust ja proteiini ekspressiooni.

Reporterigeened

1. Roheline fluoresentsproteiini gene (GFP) : Eelised: Lihtne tuvastada, stabiilne fluoresentsus, mitte-toksiline rakudele, sobiv elavate rakkude kujustamiseks. Nädalad: Piiratud fluoresentsuse tugevus.
2. Tugevdatud roheline fluoresentsproteiin (eGFP) : Eelised: Üle 6 korda valgem kui loodusliku liiki GFP, mis teeb selle sobivamaks reporterigeneina geneekspressiooni, -reguleerimise uurimiseks, rakujagunemise ja proteiini paigutuse ning transpordi organisatsioonides.
3. Punased fluoresentsproteiinid (nt mCherry) : Eelised: Pikkemad eksitatsiooni ja emisiooni lainepikkused, mis viivad madalamale tausta sisserakkude kujustamisel, suurepärane fluoresentsuse tugevus ja fotostabiilsus ning madalam raku toksitsus. Nädalad: Võib mitte olla nii tavaline kui GFP mõnes eksperimentaalses olukorras.
4. Kevadtuli luciferase : Eelised: ATP, magneesiumi ionide ja hapniku olemasolus võib see katalüüsida luciferiinioksüdeerimist oxiluciferiniks, mis emitseerib bioluminesentsi. Seda sobivad kasutada kontrollina sihtgene tõlgetoimsuse uurimiseks emaliiglastes, rakude elujõudlikkuse hindamiseks ja in vivo pildistamise analüüsideks.

Kohustuslik väljaandmine

Kui otsustada, milline reporteri mRNA muundluste meetod on eelistatav, sõltub see spetsiifilistest eksperimentaalsest eesmärgist, uurimistaustast ja eksperimentaalsetest tingimustest. Näiteks kui on vaja suurt tundlikkust, võib eGFP olla parem valik. Kui on vaja pildistada pikemate lainepikkuste juures, et vähendada taustahäiret, võivad punased fluoresentsed proteday nagu mCherry olla sobivamad. Lisaks võib valida vastav muundluste meetod spetsiifiliste mRNA muundluste vajaduste järgi (nt stabiilsuse tugevdamine, tõlkeeffektiivsuse parandamine).

Kui suurimate mikrobsete bioloogiliste toodete CRDMO ettevõtteks Hiina piirkonnas, pakub Yaohai Bio-Pharma lõpust lõpuni kohandatud ühendusi või eraldiseisvaid teenuseid, hulgist, mis ulatub RNA sünteesist, ahela insenerimisest ja ehitamisest, ülemjuhtimis- ja alumjuhtimisprotsesside arendamiseni ning GMP või mitte-GMP tasemel ravimite aine tootmiseks ning täitmiseks ja lõpetamiseks erinevatesse mudeliteesse, nagu mRNA, circRNA, plasmid RNA, rekombinantseted proteiinid, peptiidid, enzyimid, ühe domeeni antikehad ja VLP-d inimeste ja loomade kasutamiseks.

Yaohai Bio-Pharma otsib ka aktiivselt globaalseid partnerite institutsioonide või isikute naftas ning pakub tööstuses kõige konkurentsivõimsemaid tasusid. Kui teil on midagi küsimusi, siis ÄRGE HESITATE meiega ühendust võtta: [email protected]