LNP Lipid Sammensætning Identifikation og Kvantitet
Betydningen af LNP-lipidsammensætningsanalyse
Lipidnanopartikler (LNP'er), der omfatter kationisk lipid, kolesterol, phospholipid og PEG-konjugatlipid, tjener som fremtrædende leveringssystemer til mRNA-lægemiddelprodukter. Stabiliteten og dobbeltlagsfluiditeten af LNP'er afhænger af egenskaberne og indholdet af de forskellige lipider, der anvendes i formuleringssystemet. Sammensætningen af lipiderne er meget vigtig for, hvor godt LNP'er leverer lægemidler.
Yaohai-BioPharma leverer løsninger til identifikation og kvantificering af mRNA-LNP-lipidsammensætning ved hjælp af højtydende væskekromatografi med ladet aerosoldetektion (HPLC-CAD) metode.
Regulatoriske krav til lipidsammensætning
Ifølge WHO's lovgivningsmæssige overvejelser, "Den endelige sammensætning af vaccinen, inklusive lipiderne, bør beskrives sammen med mængden af komponenterne i hver præsentation."
Analytisk metode
Analyse | Metoder |
Lipidsammensætning | HPLC kombineret med Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
Procedure
Trin 1. Lipidprøveforberedelse
Valget af fortyndingsmiddel er af afgørende betydning for analysen af lipidkomponenter i mRNA-LNP-lægemiddelprodukter. Fortyndingsmidlet bør effektivt opløse hver lipidkomponent og forstyrre enhver interaktion mellem lipider og indkapslet mRNA. Potentielle fortyndingsmidler omfatter ethanol, ethanol/dimethylsulfoxid (DMSO), ethanol/formamid, ethanol/triethylaminacetat og andre.
Trin 2. HPLC-CAD
Omvendt fase væskekromatografi (RP-HPLC) parret med en ladet aerosoldetektor (CAD) er blevet inkorporeret i LNP-lipidsammensætningstestning. I betragtning af at lipider mangler kromoforer og ikke absorberer ultraviolet (UV) stråling uden derivatisering, er fordampning typisk udfordrende. CAD, som er mere følsom, kan skelne et bredere spektrum af lipidindhold. Tidligere blev en ultrahøj ydeevne væskekromatografi (UHPLC) koblet med en ladet aerosol detektor (CAD) metode formuleret og anvendt i lipidanalyse til små interfererende RNA (siRNA) LNP undersøgelser.
Trin 3. Dataanalyse
Mængden af hvert lipid i prøven involverede beregninger afledt af standardkurven ganget med fortyndingsfaktoren. Denne proces gav lipidindholdet for hver bestanddel i mRNA-LNP-prøven.
Tilfælde af LNP-lipidsammensætningsanalyse med HPLC-CAD
Baseret på HPLC-CAD har Yaohai-BioPharma udviklet en robust metode til analyse af lipidkomponenter i mRNA-LNP. Denne metode blev valideret til at være lineær, repeterbar, præcis, nøjagtig og specifik for LNP-formuleringer, som kunne understøtte procesudvikling, formuleringsudvikling, stabilitetstestning og mRNA-LNP-frigivelse.
Kromatografisk profil af 4 lipider ved Yaohai-BioPharmas HPLC-CAD-metode
Lineariteten af Yaohai-BioPharmas HPLC-CAD-metode (R2＞0.99)
EN
