Сёння Yaohai вельмі цікава падзяліцца сваім пратаколам расшыфроўкі in vitro для доўгай РНК. Гэта эфектыўная стратэгія, якую навукоўцы часта выкарыстоўваюць для вытворчасці РНК у лабараторыі. Такім чынам даследчыкі могуць вырабіць значна вялікую колькасць доўгіх РНК - тое, што важна для вывучэння ў розных галінах біялогіі. Тут мы прапануем пакрокавае кіраўніцтва па падрыхтоўцы доўгіх РНК з дапамогай транскрыпцыі in vitro. Мы таксама пагаворым аб тым, як мы можам палепшыць гэты працэс, і паспрабуем вырашыць некаторыя праблемы, з якімі вы сутыкаецеся пры сінтэзе доўгай РНК.
Некалькі асноўных кампанентаў неабходныя для транскрыпцыі in vitro, асабліва доўгая РНК. Вам трэба будзе забяспечыць фермент пад назвай РНК-палімераза, матэрыял для запісу ў выглядзе нуклеатыд-трыфасфатаў (NTP), буфер для садзейнічання рэакцыі і некаторыя шаблоны ДНК. Як гэта зрабіць крок за крокам, вы можаце знайсці тут:
Некалькі фактараў вельмі важныя для добрага сінтэзу РНК. У першую чаргу важная колькасць іёнаў магнію ў самім буферы. РНК-палімеразе патрабуецца значная колькасць магнію для падтрымання належнага ўзаемадзеяння з шаблонам ДНК і наступнага згортвання РНК. Другі важны аспект, які трэба ўлічваць, - гэта канцэнтрацыя шаблону ДНК. У прыватнасці, у вас павінна быць дастаткова рэакцыі шаблоннай ДНК, каб атрымаць добры выхад РНК.
Зразумела, доўгая РНК узнікне са сваімі праблемамі. Што гэтыя праблемы могуць быць звязаны з распадам РНК, уплываць на згортванне РНК і нарошчванне структур, якія патэнцыйна перашкаджаюць сінтэзу РНК. Адзін са спосабаў вырашыць гэтыя праблемы - наладзіць буфер, які вы бераце. Для больш поўнай структуры РНК даследчыкі могуць дадаваць розныя спецыяльныя хімічныя рэчывы, такія як DTT і п-меркаптаэтанол, каб дапамагчы РНК правільна згортвацца і прадухіліць яе зліпанне або зліпанне.
Акрамя таго, не ўсе доўгія тыпы РНК аднолькавыя, і для некаторых могуць спатрэбіцца альтэрнатыўныя метады сінтэзу. Існуюць спецыяльныя асаблівасці, якія даследчыкам можа спатрэбіцца дадаць у РНК, напрыклад, дадаць 5 каўпачкоў або хвост Poly-A. Калі гэта неабходна (як тлумачыцца пазней), даследчыкі павінны ўключыць іншыя ферменты, такія як гуанілілтрансфераза і полі(А)палімераза. Таксама трэба выбраць адпаведны фермент РНК-палімеразу, які натуральным чынам дазваляе ім вырабляць больш РНК. Як толькі доўгая РНК павінна быць сінтэзавана, нам трэба будзе вызначыць лепшы стан.
Расшыфроўка доўгіх РНК in vitro. Пратакол расшыфроўкі доўгіх РНК in vitro існуе ў шэрагу ключавых спосабаў выкарыстання ў некалькіх даследаваннях, аналізах і тэрапеўтычных мерапрыемствах. Гэта дапамагае навукоўцам зразумець структуру РНК, тое, як яна працуе і як яны могуць мадыфікаваць гены з дапамогай сучасных тэхналогій. Яшчэ на днях - адкрыццё розных хвароб і метадаў іх лячэння, напрыклад сучасных РНК-тэрапій - дазвольце паверыць, наколькі карыснымі для медыцыны могуць быць гэтыя чытанні ў тэхналогіях.
Выкарыстанне гэтага пратаколу мае шмат пераваг. Метад, заснаваны на электрафарэзе, звычайна з'яўляецца найбольш эфектыўным і эканамічна эфектыўным спосабам атрымання вялікай колькасці доўгай РНК. Акрамя якасці РНК, добры выхад таксама з'яўляецца важным фактарам для даследчыкаў, каб дапамагчы ім у іх даследаванні, асабліва калі яны маюць патрэбу ў вялікай колькасці РНК для эксперыментаў з-за высокага ўваходнага матэрыялу для пачатку. Акрамя таго, транскрыпцыя in vitro доўгай РНК звычайна больш дакладная і ўзнаўляемая, чым хімічны сінтэз або клеткавы сінтэз РНК.
Yaohai BioPharma - гэта 10 лепшых мікробных CDMO, якія ўключаюць у сябе пратакол транскрыптаў in vitro для доўгай РНК, а таксама нарматыўныя пытанні. У нас ёсць сістэма менеджменту якасці, якая адпавядае дзеючым стандартам GMP, а таксама сусветным правілам. Наша каманда экспертаў па нарматыўных правах валодае глабальнай нарматыўнай базай для паскарэння запуску біялагічных прадуктаў. Мы гарантуем прасочванне якасных вытворчых працэсаў, а таксама адпаведнасць правілам FDA ЗША і ЕС EMA. Аўстралія TGA і Кітай NMPA таксама задаволеныя. Yaohai BioPharma паспяхова прайшла аўдыт на месцы кваліфікаванага спецыяліста Еўрапейскага саюза (QP) для нашай сістэмы якасці GMP, а таксама нашага вытворчага аб'екта. Акрамя таго, мы прайшлі першыя сертыфікацыйныя аўдыты сістэмы кіравання якасцю ISO9001, сістэмы кіравання навакольным асяроддзем ISO14001 і сістэмы кіравання аховай здароўя і бяспекі ISO45001.
Кампанія Yaohai Bio-Pharma, якая ўваходзіць у топ-10 вытворцаў біялагічных прадуктаў, з'яўляецца спецыялістам у галіне мікробнай ферментацыі. Мы стварылі сучаснае прадпрыемства, якое абсталявана сучасным абсталяваннем і магутнымі вытворчымі магчымасцямі RD. У нас ёсць пяць ліній па вытворчасці лекавых субстанцый, якія адпавядаюць патрабаванням GMP для мікробнай ферментацыі і ачысткі, а таксама дзве аўтаматызаваныя лініі напаўнення для картрыджаў, флаконаў, а таксама напоўненых шпрыцаў. Даступныя маштабы закісання вар'іруюцца ад 100 л да 500 л, 1000 л і 2000 л. Пратакол расшыфроўкі in vitro для доўгай РНК для адтулін складае ад 1 да 25 мл, у той час як спецыфікацыі напаўнення папярэдне напоўненых шпрыцаў і картрыджа ахопліваюць 1-3 мл. Наша вытворчая майстэрня адпавядае патрабаванням cGMP і гарантуе стабільныя пастаўкі клінічных узораў, а таксама камерцыйных тавараў. Наш завод вырабляе вялікія малекулы, якія пастаўляюцца па ўсім свеце.
Yaohai Bio-Pharma мае вопыт у вытворчасці біяпрэпаратаў, якія ствараюцца з мікраарганізмаў. Мы прапануем індывідуальныя рашэнні RD, а таксама вытворчыя паслугі, зводзячы да мінімуму магчымыя рызыкі. Мы працавалі з рознымі метадамі, такімі як рэкамбінантныя клеткавыя субадзінкі, вакцыны (уключаючы пептыды), фактары росту, гармоны і пратакол транскрыптаў in vitro для доўгай РНК. Мы з'яўляемся спецыялістам у галіне многіх мікраарганізмаў, такіх як пазаклеткавая і ўнутрыклеткавая сакрэцыя дрожджаў (выхад да 15 г/л) і ўнутрыклеткавых растваральных бактэрый і цельца ўключэння (выхад да 10 г/л). Мы таксама распрацавалі платформу ферментацыі BSL-2 для стварэння бактэрыяльных вакцын. Мы маем вопыт удасканалення вытворчых працэсаў, тым самым павялічваючы ўраджайнасць і зніжаючы выдаткі. У нас ёсць высокаэфектыўная тэхналагічная каманда, якая забяспечвае своечасовую і якасную рэалізацыю праектаў. Гэта дапамагае нам хутчэй выводзіць на рынак унікальныя прадукты.
Yaohai Bio-Pharma з'яўляецца вядучым у галіне пратаколу расшыфроўкі in vitro для доўгай РНК CDMO. Наша галоўная ўвага - вытворчасць мікробных вакцынацый і тэрапеўтычных прэпаратаў для лячэння хатніх жывёл, здароўя людзей і ветэрынараў. У нас ёсць перадавыя RD і вытворчыя тэхналагічныя платформы, якія ахопліваюць увесь вытворчы працэс ад распрацоўкі мікробных штамаў да апрацоўкі банка клетак і распрацоўкі метадаў да клінічнай і камерцыйнай вытворчасці, гарантуючы, што мы можам забяспечыць паспяховую дастаўку самых перадавых рашэнняў. . Мы назапасілі велізарную колькасць ведаў у галіне біяапрацоўкі мікробаў. Больш за 200 праектаў былі паспяхова завершаны, і мы дапамагаем нашым кліентам выконваць такія правілы, як FDA ЗША, а таксама EMA ЕС. Мы таксама дапамагаем ім арыентавацца ў Аўстраліі TGA і Кітаі NMPA. Дзякуючы нашаму вопыту і ведам мы можам хутка рэагаваць на патрабаванні рынку і прапаноўваць індывідуальныя паслугі CDMO.