Theo giáo điều trung tâm, RNA thông tin (mRNA) là cầu nối để truyền vật liệu di truyền từ DNA sang protein.
mRNA đóng vai trò sinh học bằng cách mã hóa protein in vivo và mRNA trưởng thành ở sinh vật nhân chuẩn bao gồm năm thành phần: 5' Cap (cấu trúc nắp), 5' UTR (vùng không mã hóa), ORF (khung đọc mở), 3ʹ UTR và đuôi polyA 3' (đuôi polyadenylate).
Chi tiết dịch vụ
| Quy trình xét duyệt | Dịch vụ tùy chọn | Chi tiết dịch vụ | Thời gian giao hàng (Ngày) |
| thiết kế và tối ưu hóa trình tự mRNA | Thiết kế và tối ưu hóa trình tự mã hóa | Căn chỉnh trình tự CDS Tối ưu hóa codon CDS | 1 |
| Thiết kế và tối ưu hóa các chuỗi không mã hóa | 5' Thiết kế và tối ưu hóa trình tự UTR 3' Thiết kế và tối ưu hóa trình tự UTR thiết kế và tối ưu hóa trình tự polyA | 1-2 |
Tùy chọn tùy chỉnh
| 5'UTR/3'UTR | - Trình tự UTR tự nhiên
- Trình tự UTR đột biến/được thiết kế
|
| Đuôi 3' PolyA | - Đuôi 100A ~ 120A (khuyên dùng)
- Đuôi polyA được phân đoạn
- Đuôi tùy chỉnh khác
|
Các chiến lược chung cho thiết kế trình tự mRNA
| Thành phần mARN | Chức năng sinh học | Chiến lược tối ưu hóa |
| Mũ lưỡi trai 5' | Bảo vệ mRNA khỏi sự phân hủy bởi exonuclease và hoạt động phối hợp với đuôi polyA ở đầu 3', protein liên kết polyA và protein yếu tố khởi đầu dịch mã để bắt đầu quá trình dịch mã protein. | Cấu trúc Cap1 tự nhiên tránh các thụ thể nhận dạng mẫu và do đó làm giảm phản ứng miễn dịch tự nhiên, điều này có thể đạt được bằng cách gắn giới hạn đồng phiên mã một bước hoặc giới hạn enzyme hai bước [xem giới hạn enzyme mRNA và giới hạn đồng phiên mã để biết chi tiết]. |
| 5' UTR | UTR 5' có thể được ribosome nhận biết, điều hòa quá trình dịch mã của mRNA và ảnh hưởng đến tính ổn định của mRNA. | Chứa các chuỗi Kozak không có cấu trúc thứ cấp rất ổn định. UTR tự nhiên của các gen có biểu hiện cao được ưu tiên sử dụng cho các mRNA phiên mã in vitro (IVT) như α-globin và β-globin. |
| CDS | Vùng mã hóa protein và trình tự mã hóa kháng nguyên, kháng thể hoặc các protein chức năng khác. | Tối ưu hóa codon làm tăng mức độ dịch mã, lưu ý rằng một số codon không tối ưu nhất định có thể đóng vai trò trong việc gấp protein. |
| 3' UTR | Điều chỉnh sự dịch mã và tính ổn định của mRNA. | UTR tự nhiên của các gen biểu hiện cao được ưu tiên cho các mRNA IVT như α-globin và β-globin. |
| Đuôi polyA 3' | Điều chỉnh sự biểu hiện protein và bảo vệ cấu trúc nắp khỏi bị thoái hóa. | Cần có độ dài thích hợp (100-150 bp); mã hóa đuôi polyA trên plasmid mẫu phiên mã đảm bảo độ dài đuôi polyA được xác định rõ hơn. |
Các tính năng của chúng tôi
- Lựa chọn nguồn UTR đa dạng
Nhiều nguồn thư viện UTR tự nhiên và được sửa đổi cao; chiến lược sửa đổi UTR trưởng thành;
- Nhóm tối ưu hóa CDS tiên tiến
Hợp tác với nhóm thuật toán AI chuyên nghiệp để hoàn thành việc tối ưu hóa codon.
Thêm trình tự polyA theo mẫu DNA để kiểm soát độ dài mRNA chính xác hơn.
- Kết hợp tối ưu hóa đa dạng
Đạt được sự biểu hiện hiệu quả của mRNA với khả năng miễn dịch thấp.
nghiên cứu trường hợp
Thiết kế trình tự của mRNA phóng viên kép: mCherry-eGFP mRNA
Dịch vụ mRNA của Yaohai Bio-Pharma tiếp tục được nâng cấp với việc thiết kế và tối ưu hóa trình tự song song gen phóng viên kép, đạt được sự đồng biểu hiện của gen kép.
Bằng cách sử dụng thuốc thử chuyển nhiễm thông thường, trình tự gen kép mCherry-eGFP mRNA được chuyển vào các tế bào 293T và hai tín hiệu huỳnh quang của mCherry (màu đỏ) và protein huỳnh quang màu xanh lá cây tăng cường (eGFP) được phát hiện với biểu hiện đồng thời sau 48 giờ và xếp chồng lên nhau. đồ thị được đánh dấu màu vàng.
Biểu hiện mCherry-eGFP mRNA trong tế bào 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
KHÔNG
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
