Cơ sở của việc đóng gói là thiết kế và phát triển hệ thống phân phối. Một hệ thống phân phối được thiết kế tốt cho phép các phân tử CircRNA đi vào cơ thể mà không bị các enzyme RNA phân hủy và sau đó được phân phối một cách hiệu quả đến vị trí đích, xuyên qua màng tế bào và được giải phóng vào nội bào.
Các hạt nano lipid (LNP) là hệ thống phân phối tốt nhất hiện có, với các ưu điểm về đóng gói, biểu hiện in vivo và an toàn in vivo so với các hệ thống phân phối khác. LNP với các đoạn axit nucleic dễ dàng được nuốt vào tế bào và hình thành cơ thể nội bào. Sau khi vào tế bào, môi trường axit của cơ thể nội bào sẽ tạo ra proton và tích điện dương cho phần đầu của lipid bị ion hóa, do đó hợp nhất với màng trong của cơ thể nội bào và giải phóng axit nucleic mục tiêu vào tế bào để hoạt động.
Dịch vụ CircRNA của Yaohai Bio-Pharma tiếp tục được cải thiện và có thể cung cấp dịch vụ đóng gói CircRNA-LNP để tối ưu hóa các thông số quy trình quan trọng có liên quan, đồng thời cải thiện tính nhất quán và khả năng tái sản xuất của quá trình sản xuất thuốc CircRNA.
Quy trình xét duyệt | Chi tiết dịch vụ | Thời gian giao hàng (Ngày) | Phân phôi |
đóng gói CircRNA-LNP | Tiền xử lý vật liệu và chất lỏng | 2 | Sản phẩm thuốc CircRNA-LNP (DP) |
Trộn thiết bị vi lỏng | |||
Lọc dòng tiếp tuyến | 1 | ||
Lọc khử trùng | |||
kiểm soát chất lượng CircRNA-LNP | Hiệu quả đóng gói | 1 | Báo cáo thử nghiệm |
Kích thước hạt và chỉ số Polydispersity | |||
Tiềm năng Zeta |
Tổng hợp nhanh, hiệu quả R&D cao và các giải pháp được tối ưu hóa trước;
Tỷ lệ đóng gói có thể đạt hơn 90%;
Kích thước của hạt nano lipid có thể được kiểm soát bằng cách thay đổi tốc độ và tỷ lệ phun chất lỏng;
Các sản phẩm CircRNA-LNP được xác nhận bằng cách biểu hiện tế bào in vitro và có thể biểu hiện protein mục tiêu một cách hiệu quả.
Các mẫu CircRNA LNP-eGFP được chuẩn bị và các liều khác nhau của chúng (1ug, 2ug và 4ug) được truyền trực tiếp vào các tế bào 293T để xác minh xem chúng có thể biểu hiện protein mục tiêu hay không. Sau 48 giờ truyền máu, có thể quan sát thấy tín hiệu huỳnh quang rõ ràng và có hiệu ứng tăng liều của cường độ huỳnh quang.
Lipo-circ_eGFP, được tạo thành từ liposome và eGFP CircRNA không bao bọc được dùng làm đối chứng.