Các sản phẩm thu được từ quá trình tạo vòng trong ống nghiệm và làm giàu RNase R cần được loại bỏ thêm khỏi phiên mã in vitro (IVT), bao gồm các chất nền không được tiêu thụ trong phản ứng tạo vòng, các sản phẩm phụ của phản ứng và RNA được gắn biệt danh.
Yaohai Bio-Pharma có kết tủa LiCl trưởng thành, tinh chế hạt từ tính, tinh chế tự phát triển và các giải pháp tinh chế đa dạng khác để loại bỏ hiệu quả các tạp chất khác nhau và chuẩn bị CircRNA có độ tinh khiết cao.
Dung dịch tinh chế một lượng nhỏ CircRNA để chuyển đổi tế bào và là một phần của thí nghiệm trên động vật.
Dung dịch tinh chế một lượng nhỏ CircRNA để chuyển hóa tế bào và là một phần của thí nghiệm trên động vật.
Kịch bản ứng dụng với chất lượng cao hơn;
Quy trình thanh lọc ổn định và có thể mở rộng để đáp ứng yêu cầu sản xuất GMP.
Quy trình xét duyệt | Dịch vụ tùy chọn | Chi tiết dịch vụ | Thời gian giao hàng (Ngày) | Phân phôi |
tuần hoànRNA | Giải pháp thanh lọc thông thường | Kết tủa liti clorua | 1 | dược chất CircRNA |
Tinh chế hạt từ tính | ||||
Tinh chế CircRNA có độ tinh khiết cao | Sắc ký lỏng hiệu năng cao chuẩn bị (HPLC) | 1-2 | ||
Trao đổi bộ đệm | Siêu lọc | 1 | ||
kiểm soát chất lượng tuần hoànRNA | Nồng độ / thanh lọc | Đo quang phổ tia cực tím (UV) | 0.5 | Báo cáo thử nghiệm |
Tinh khiết | Điện di trên gel agarose (AGE)/E-gel | |||
HPLC-tùy chọn | 1 |
Kịch bản ứng dụng có thể đạt được.
CircRNA có độ tinh khiết trên 90%;
Thông qua việc kiểm soát chặt chẽ RNase trong môi trường thí nghiệm và vật tư tiêu hao, sự phân hủy RNA được ngăn chặn một cách hiệu quả.
Yaohai Bio-Pharma đã thiết lập một giải pháp tinh chế CircRNA trưởng thành có thể loại bỏ hiệu quả các tạp chất khác nhau liên quan đến quy trình.
Các sản phẩm RNA dạng vòng được tinh chế bằng dung dịch thông thường rõ ràng vẫn được trộn lẫn với RNA có biệt danh và các intron.
Sau khi giải pháp tinh chế do Yaohai Bio-Pharma phát triển, các tạp chất RNA tuyến tính khác nhau, chẳng hạn như RNA có biệt danh và intron, có thể được loại bỏ thành công.
Xác thực biểu thức CircRNA
Bằng cách sử dụng liposome thông thường, CircRNA eGFP tinh khiết được chuyển vào tế bào 293T và tín hiệu huỳnh quang được quan sát thấy sau 24 giờ và tiếp tục được tăng cường sau 48 giờ. Tín hiệu huỳnh quang vẫn có thể được phát hiện vào ngày thứ 7 và ngày thứ 14 sau khi truyền máu.