Cơ sở của quá trình bao bọc là thiết kế và phát triển hệ thống vận chuyển. Một hệ thống vận chuyển được thiết kế tốt cho phép các phân tử circRNA đi vào cơ thể mà không bị phân hủy bởi enzym RNA và sau đó được vận chuyển hiệu quả đến vị trí mục tiêu, vượt qua màng tế bào và được giải phóng bên trong tế bào.
Các hạt lipid nano (LNPs) là hệ thống vận chuyển tốt nhất hiện có, với những ưu điểm về khả năng bao bọc, biểu hiện trong cơ thể và độ an toàn trong cơ thể so với các hệ thống vận chuyển khác. LNPs chứa các đoạn axit nucleic dễ dàng được tế bào nuốt vào và hình thành các cấu trúc nội bào. Khi vào tế bào, môi trường acid của cấu trúc nội bào sẽ proton hóa và tạo điện tích dương cho đầu lipid ion hóa, từ đó hòa trộn với màng nội của cấu trúc nội bào và giải phóng axit nucleic mục tiêu vào tế bào để hoạt động.
Dịch vụ circRNA của Yaohai Bio-Pharma tiếp tục được cải thiện và có thể cung cấp dịch vụ bao bị circRNA-LNP để tối ưu hóa các thông số quy trình quan trọng liên quan và nâng cao tính nhất quán và tái hiện được trong sản xuất thuốc circRNA.
Quy trình | Chi Tiết Dịch Vụ | Thời gian giao hàng (Ngày) | Các kết quả đạt được |
bao bị circRNA-LNP | Xử lý tiền xử lý vật liệu và dung dịch | 2 | sản phẩm thuốc circRNA-LNP (DP) |
Trộn bằng thiết bị vi lưu chất | |||
Lọc dòng chảy tiếp tuyến | 1 | ||
Lọc tiệt trùng | |||
kiểm soát chất lượng circRNA-LNP | Hiệu suất bao bị | 1 | Báo cáo thử nghiệm |
Kích thước hạt và chỉ số đa phân | |||
Tiềm năng Zeta |
Hợp thành nhanh, hiệu quả R&D cao và các giải pháp được tối ưu trước;
Tỷ lệ bao bọc có thể đạt hơn 90%;
Kích thước của các hạt nano lipid có thể được kiểm soát bằng cách thay đổi tốc độ và tỷ lệ tiêm dung dịch;
sản phẩm circRNA-LNP được xác nhận thông qua biểu hiện tế bào in vitro và có thể biểu hiện protein mục tiêu một cách hiệu quả.
Mẫu LNP-eGFP circRNA được chuẩn bị và các liều lượng khác nhau của chúng (1ug, 2ug và 4ug) được chuyển trực tiếp vào tế bào 293T để kiểm tra xem chúng có thể biểu hiện protein mục tiêu hay không. Sau 48 giờ chuyển gen, có thể quan sát thấy tín hiệu huỳnh quang rõ ràng, và có hiệu ứng tăng dần về cường độ huỳnh quang theo liều lượng.
Lipo-circ_eGFP, bao gồm liposome và eGFP circRNA không được bao bọc, được sử dụng làm đối chứng.