ЛНП липидни састав Идентификација и количина
Значај анализе ЛНП липидног састава
Липидне наночестице (ЛНП), које се састоје од катјонског липида, холестерола, фосфолипида и ПЕГ-коњугата липида, служе као истакнути системи за испоруку иРНК лекова. Стабилност и двослојна течност ЛНП зависе од својстава и садржаја различитих липида који се користе у систему формулације. Састав липида је веома важан за то колико добро ЛНП испоручују лекове.
Иаохаи-БиоПхарма пружа решења за идентификацију и квантификацију састава мРНА-ЛНП липида коришћењем течне хроматографије високих перформанси са детекцијом напуњеног аеросола (ХПЛЦ-ЦАД) методе.
Регулаторни захтеви за састав липида
Према регулаторним разматрањима СЗО, „Коначни састав вакцине, укључујући липиде, треба описати заједно са количином компоненти у свакој презентацији.
Аналитицал Метход
Анализа |
Методе |
Липид Цомпоситион |
ХПЛЦ у комбинацији са Цорона Цхаргед Аеросол Детецтор (ЦАД) |
Поступак
Корак 1. Припрема узорка липида
Избор разблаживача је од највеће важности за анализу липидних компоненти у мРНА-ЛНП лековитим производима. Разблаживач треба да ефикасно раствори сваку липидну компоненту и поремети било какву интеракцију између липида и инкапсулиране мРНК. Потенцијални разблаживачи обухватају етанол, етанол/диметил сулфоксид (ДМСО), етанол/формамид, етанол/триетиламин ацетат и друге.
Корак 2. ХПЛЦ-ЦАД
Течна хроматографија реверзне фазе (РП-ХПЛЦ) упарена са детектором напуњеног аеросола (ЦАД) је укључена у испитивање састава ЛНП липида. С обзиром на то да липидима недостају хромофори и да не апсорбују ултраљубичасто (УВ) зрачење без дериватизације, испаравање је обично изазовно. ЦАД, пошто је осетљивији, може да уочи шири спектар садржаја липида. Раније је формулисана течна хроматографија ултрависоких перформанси (УХПЛЦ) у комбинацији са методом детектора напуњеног аеросола (ЦАД) и примењена у анализи липида за мале интерферирајуће РНК (сиРНА) ЛНП студије.
Корак 3. Анализа података
Количина сваког липида у узорку је укључивала прорачуне изведене из стандардне криве помножене фактором разблажења. Овај процес је дао садржај липида за сваки састојак у узорку мРНА-ЛНП.
Случај анализе ЛНП липидног састава са ХПЛЦ-ЦАД
На основу ХПЛЦ-ЦАД, Иаохаи-БиоПхарма је развио робустан метод за анализу липидних компоненти мРНА-ЛНП. Ова метода је потврђена као линеарна, поновљива, прецизна, тачна и специфична за ЛНП формулације, што може да подржи развој процеса, развој формулације, тестирање стабилности и ослобађање мРНА-ЛНП.
Хроматографски профил 4 липида према Иаохаи-БиоПхарма ХПЛЦ-ЦАД методи
Линеарност Иаохаи-БиоПхарма ХПЛЦ-ЦАД методе (Р2＞0.99)
EN
