Основа инкапсулације је дизајн и развој система испоруке. Добро дизајниран систем за испоруку омогућава молекулима цирцРНА да уђу у тело без разградње РНК ензима, а затим се ефикасно испоруче на циљно место, прођу кроз ћелијску мембрану и отпусте се интрацелуларно.
Липидне наночестице (ЛНП) су најбољи доступни системи за испоруку, са предностима у инкапсулацији, ин виво експресији и ин виво безбедности у поређењу са другим системима испоруке. ЛНП са фрагментима нуклеинске киселине лако се прогутају у ћелије и формирају интрацелуларна тела. Када једном уђе у ћелију, кисело окружење интрацелуларног тела протонира и позитивно наелектрише главу јонизованог липида, чиме се стапа са унутрашњом мембраном интрацелуларног тела и ослобађа циљну нуклеинску киселину у ћелију за деловање.
Услуга Иаохаи Био-Пхарма цирцРНА наставља да се побољшава и може да обезбеди услугу инкапсулације цирцРНА-ЛНП за оптимизацију релевантних критичних параметара процеса и побољшање конзистентности и поновљивости производње цирцРНА лекова.
Proces | Детаљи услуге | Период испоруке (дан) | Деливераблес |
цирцРНА-ЛНП инкапсулација | Предтретман материјала и течности | 2 | цирцРНА-ЛНП лек (ДП) |
Микрофлуидно мешање уређаја | |||
Филтрација тангенцијалног тока | 1 | ||
Стерилизујућа филтрација | |||
цирцРНА-ЛНП контрола квалитета | Ефикасност енкапсулације | 1 | Тест извештај |
Величина честица и индекс полидисперзности | |||
Зетски потенцијал |
Брза синтеза, висока ефикасност истраживања и развоја и унапред оптимизована решења;
Однос енкапсулације може достићи више од 90%;
Величина липидних наночестица може се контролисати променом брзине убризгавања течности и односа;
цирцРНА-ЛНП производи су потврђени експресијом ћелија ин витро и могу ефикасно да експримирају циљни протеин.
ЛНП-еГФП цирцРНА узорци се припремају и њихове различите дозе (1уг, 2уг и 4уг) се директно трансфектују у 293Т ћелије да би се проверило да ли могу да експримирају циљни протеин. После 48 сати трансфекције, може се приметити јасан флуоресцентни сигнал, а постоји и ефекат ескалације дозе интензитета флуоресценције.
Липо-цирц_еГФП, који се састоји од липозома и некапсулиране цирцРНА еГФП, узима се као контрола.