Priprema circRNA zahteva linearnu RNA kao prethodnik materijal (RNA prethodnik) za ciklizaciju, gde je RNA prethodnik obično pripremljen koristeći linearizovani plazmidni DNA kao šablon za transkripciju i transkribiran in vitro uz pomoć T7 RNA polimeraze.
Visokokvalitetni plazmidni DNA je ključan za transkripciju in vitro (IVT). Na osnovu zrele usluge pripreme plazmida, Yaohai Bio-Pharma može ponuditi uslugu pripreme visoke čistoće i standardne linearizovane plazmidne DNA (pDNA) kako bi se osigurala integritet IVT proizvoda.
Detalji usluga
| Процес |
Opcionalna Usluga |
Detalji usluge |
Rok isporuke (radni dan) |
| Priprema cirkularnog plazmita |
Sinteza gene |
Sinteza Gena (Trece strane) |
7-10 |
| Amplifikacija Plazmida |
Amplifikacija Plazmida |
2 |
| Ekstrakcija Plazmida |
| Priprema Linearnog Plazmida |
Linearizacija i očišćavanje plazmida |
Linearizacija plazmida |
1 |
| Ciscenje Linearnog DNA-a |
| Kontrola kvaliteta plazmidnog DNA-a |
Koncentracija čistoće |
Ultravijoletna (UV) Spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmidna konformacija |
Elektroforeza u agaroznom gełu (AGE) |
| Kapilarna elektroforeza (CE) - Opcionalno |
| Identifikacija plazmida |
Identifikacija restrikcionih enzima / AGE |
Naše karakteristike
- Šablon Plazmid bez linearizacije
G fleksibilan odabir metoda linearizacije
Optimizacija metoda izvlačenja i očišćivanja DNA za postizanje visokih stopa oporavka.
- Строга контрола квалитета
Strogost standarda procesa, sa stopom superheliksnog konformiteta plazmid uzoraka za istraživanje preko 80%.
- Dovoljno razvijeni platformski proces
Visoki standardi i efikasna priprema plazmida i usluge kontrole kvaliteta za ispunjavanje eksperimentalnih potreba.
Studija slučaja
Uzimajući kao primer proizvod Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA, stopa superuvanja uzoraka šablonskih plazmida (istraživački nivo) je preko 70%, sa stopom linearizacije blizu 100%.
mCherry circRNA se priprema koristeći linearizovani plazmid kao šablon i transfekcija se vrši u 293T ćelijama. Nakon 24 sata transfekcije detektovan je visok nivo izražavanja fluorescencije (crvena fluorescencija), koji će biti pojačan nakon 48 sati, a još uvek može biti detektovan na sedmom i četrnaestom danu nakon transfekcije.
mCherry protein je stabilno i efikasno izražavan, a čistoća transkripcione šablone može ispunjiti zahteve cirkularnog RNA lekarskog proizvoda (DP) visoke kvalitete.
Validacija in vitro izražavanja mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
