Sve kategorije
kopiranje mRNA uz odmah pridruživanje kapa

zajedničko transkripcisko zakupljanje mRNA

U poređenju sa dvostepenom enzimatskom metodom zakupljanja, jednostepena metoda zajedničkog transkripciskog zakupljanja može značajno smanjiti proces. Metoda je rezultat-oriјentisana i podrazumeva dodavanje kap analogova u reakciju in vitro transkripcije (IVT). Kap analogovi mogu biti uvedeni na početku transkripcije, a mRNA sa kap strukturom se dobija nakon završetka transkripcije. Trenutno, treće generacije kap analogova mogu izbeći obrnuto zakupljanje i direktno dodati Cap 1 strukturu transkripcijskom proizvodu.

U vezi s imunogeneratornostiu mRNA u vivo i efikasnošću prevoda, proces IVT često koristi određene vrste modifikovanih NTP-ova, a česte modifikovane nukleotide su psevdouridin (Ψ), N1-metil-psevdouridin (N1Ψ) i 5-metilcitozin (5mC).

undefined

undefined

Slika: Dijagram kodiranja mRNA i reakcije zaklapanja

Detalji usluge

Usluga

Detalji usluge

Rok isporuke (radni dan)

Kodiranje tijekom transkripcije

Transkripcijski odgovor in vitro (Clean Cap analog) 1-2
Modifikacije nukleotida (Ψ/N1Ψ/5mC)
Uklanjanje DNS šablon (DNase I)

Optimizacija stanja IVT - opcionalno

Dizajn i optimizacija komponenti reakcije 3-7
Naše karakteristike
  • Raznovrsne strategije modifikacije nukleotida

Više opcionalnih strategija modifikacije nukleotida može poboljšati izraz proteina.

  • Optimizovani reakcioni sistem

Postignite visok omjer transkripcije i efikasan capping proces.

  • Stabilan proces zaklapanja

Postignite stopu zaklapanja veću od 95%.

  • Strog kontrola RNaze

Efektivno sprijecavajte degradaciju mRNA-a strogom kontrolom RNaze u eksperimentalnom okruženju i potrošnji.

Studija slučaja

Yaohai Bio-Pharma je izgradila zrelu platformu za zaklapanje u toku transkripcije, koristeći čist cap analog kako bi se direktno dodao Cap1 struktura, pri čemu se izbjegava obrnuti proces zaklapanja. Nakon standardizovanog priprema uzoraka i detekcije kapilarne elektroforezom (CE), stopa zaklapanja mRNA-a za pojačani zeleni fluoresentni protein (eGFP) može doseći preko 95%.

图片图片

efikasnost zaklapanja eGFP mRNA-a preko 95%

MRNA eGFP i mRNA mCherry pripremljeni kodavanjem uz transkripciju su transfekcijom uvedeni u 293T celije, redom, i nakon 48 sati se može primetiti jak signał fluoresencije, što ukazuje na to da je mRNA efikasno izražen u 293T celijama.

图片

Izraz mRNA eGFP i mRNA mCherry u 293T celiji

Dobijte besplatnu ponudu

Get in touch