Prema centralnom dogmatu, pošiljateljska RNA (mRNA) je most za prenos genetskog materijala od DNA do proteina.
mRNA izvodi biološku ulogu kodiranjem proteina u živome organizmu, a zreli mRNA kod eukariotskih organizama sastoji se od pet komponenti: 5' Cap (kap struktura), 5' UTR (ne-kodirajući region), ORF (otvoreni čitački frejm), 3' UTR i 3' poliA rep (poliadenilati rep).
Detalji usluga
| Процес |
Opcionalna Usluga |
Detalji usluge |
Rok isporuke (Dan) |
| dizajn i optimizacija mRNA sekvence |
Dizajn i optimizacija kodirajućih sekvenci |
Poravnanje CDS sekvence
Optimizacija kodona CDS
|
1 |
| Dizajn i optimizacija ne-kodirajućih nizova |
дизајн и оптимизација низа 5' UTR
дизајн и оптимизација низа 3' UTR
дизајн и оптимизација низа polyA
|
1-2 |
Опције које се могу прилагодити
| 5’ UTR/3’ UTR |
- Prirodna UTR sekvencija
- Mutirana/inženirska UTR sekvencija
|
| 3' PoliA rep |
- 100A ~120A Rep (preporučeno)
- Segmentirani poliA rep
- Ostali prilagođeni repovi
|
Uobičajene strategije za dizajn mRNA sekvence
| komponente mRNA |
Biološke funkcije |
Strategije optimizacije |
| 5’ Cap |
Zaštiti mRNA od degradacije eksonukleazama i saradjuje sa poliA repom na 3' kraju, poliA vezivnim proteinima i proteinima inicijatorima prevoda da bi pokrenuli prevod proteina. |
Prirodna Cap1 struktura izbegava paternski prepoznajni receptore i time smanjuje prirodnu imunsku reakciju, što se može postići jednoetapnim kod-transkripcionim kapiranjem ili dvoetapnim enzimatskim kapiranjem [pogledajte detalje o enzimatskom kapiranju mRNA i kod-transkripcionom kapiranju]. |
| 5' UTR |
5' UTR može biti prepoznat od strane ribozoma, regulisati prevod mRNA i utiči na stabilnost mRNA. |
Sadrže Kozakovske sekvence bez vrlo stabilne sekundarne strukture. Prirodni UTR-ovi visoko izraženih gena su poželjni za transkripciju u vitro (IVT) mRNA kao što su α-globin i β-globin. |
| CDS |
Regioni koji kodiraju proteine i nizovi koji kodiraju antigena, antitela ili druge funkcionalne proteine. |
Optimizacija kodona povećava nivo translacije, uz napomenu da određeni neoptimalni kodoni mogu imati ulogu u savijanju proteina. |
| 3' UTR |
Regulisanje prevođenja mRNA i stabilnosti. |
Prirodni UTR-ovi visoko izraženih gena su poželjni za IVT mRNA, kao što su α-globin i β-globin. |
| 3' poliA rep |
Regulisanje izražavanja proteina i zaštita kap strukture od degradacije. |
Potrebna je odgovarajuća dužina (100-150 bp); kodiranje poliA repa na plazmidu transkripcione šablon osigurava precizniju dužinu poliA repa. |
Naše karakteristike
- Selekcija raznovrsnih izvora UTR
Više izvora biblioteka prirodnih i modifikovanih UTR sa visokim stepenom ekspresije; savršena strategija modifikacije UTR;
- Ekipa za optimizaciju CDS na vrhu tehnologije
Saradnja sa profesionalnom ekipom algoritama umetnog inteligentnog (AI) za kompletiranu optimizaciju kodona.
- Jednoliko raspoređivanje poliA repova
Dodavanje poliA sekvenci prema DNA šablonima kako bi se dužina mRNA kontrovala preciznije.
- Raznovrsne kombinacije optimizacije
Postizanje efikasne ekspresije mRNA sa niskom imunogenosti.
Studija slučaja
Dizajn dvostrukog reportera mRNA: mCherry-eGFP mRNA
Usluga mRNA od Yaohai Bio-Pharma se ne prestaje unapređivati uz pomoć dizajna i optimizacije tandem sekvence dvostrukog reporter gena, što omogućava ko-ekspresiju dva gene.
Korišćenjem konvencionalnog reagenta za transfekciju, tandem sekvence dvostrukog gene mCherry-eGFP mRNA se transfekuje u 293T celije, a dve fluorescentske signale mCherry (crvena) i pojačana zelena fluorescentska proteina (eGFP) se detektiraju sa istovremenom ekspresijom nakon 48 sati, pri čemu je složeni grafik istaknut žutom bojom.
Izraz mCherry-eGFP mRNA u 293T ćeliji
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
