Према централној догми, гласничка РНК (мРНА) је мост за пренос генетског материјала са ДНК на протеине.
мРНА игра биолошку улогу кодирањем протеина ин виво, а зрела мРНА у еукариотским организмима састоји се од пет компоненти: 5' Цап (структура капе), 5' УТР (некодирајући регион), ОРФ (отворени оквир за читање), 3' УТР , и 3' полиА реп (полиаденилатни реп).
Proces | Опциона услуга | Детаљи услуге | Период испоруке (дан) |
Дизајн и оптимизација секвенце мРНА | Дизајн и оптимизација кодних секвенци |
Поравнање ЦДС секвенци Оптимизација ЦДС кодона |
1 |
Дизајн и оптимизација некодирајућих секвенци |
Дизајн и оптимизација 5' УТР секвенце Дизајн и оптимизација 3' УТР секвенце дизајн и оптимизација полиА секвенце |
1-2 |
5' УТР/3' УТР |
|
3' ПолиА Таил |
|
мРНА компоненте | Биолошке функције | Стратегије оптимизације |
5' Кап | Заштитите мРНК од деградације егзонуклеазама и делујте заједно са полиА репом на 3' крају, протеином који се везује за полиА и протеином фактора иницијације транслације да започне транслацију протеина. | Природна структура Цап1 избегава рецепторе за препознавање образаца и на тај начин смањује природни имуни одговор, што се може постићи ко-транскрипционим затварањем у једном кораку или ензимским затварањем у два корака (погледајте мРНА ензимско затварање и ко-транскрипционо затварање за детаље). |
5' УТР | 5' УТР могу да препознају рибозоми, регулишу транслацију мРНК и утичу на стабилност мРНК. | Садржи Козакове секвенце без веома стабилне секундарне структуре. Природни УТР високо експримираних гена су пожељнији за ин витро транскрипцију (ИВТ) мРНК као што су α-глобин и β-глобин. |
ЦДС | Региони који кодирају протеине и кодирајуће секвенце за антигене, антитела или друге функционалне протеине. | Оптимизација кодона повећава ниво транслације, уз напомену да одређени неоптимални кодони могу играти улогу у савијању протеина. |
3' УТР | Регулише транслацију и стабилност мРНА. | Природни УТР високо експримираних гена су пожељнији за ИВТ мРНК као што су α-глобин и β-глобин. |
3' полиА реп | Регулише експресију протеина и штити структуру капице од деградације. | Потребна је одговарајућа дужина (100-150 бп); кодирање полиА репа на плазмиду шаблона за транскрипцију обезбеђује дефинисанију дужину репа полиА. |
Вишеструки извори високо изражених природних и модификованих УТР библиотека; зрела стратегија модификације УТР;
Сарађујте са професионалним тимом за АИ алгоритам да бисте завршили оптимизацију кодона.
Додајте полиА секвенце према ДНК шаблонима да бисте прецизније контролисали дужину мРНА.
Остварите ефикасну експресију мРНК са ниском имуногеношћу.
Дизајн секвенце мРНА са двоструким репортером: мЦхерри-еГФП мРНА
Иаохаи Био-Пхарма услуга мРНА наставља да се надограђује дизајном и оптимизацијом тандем секвенце двоструког репортерског гена, чиме се постиже коекспресија дуалних гена.
Коришћењем конвенционалног трансфекционог реагенса, тандемска секвенца двоструког гена мЦхерри-еГФП мРНА се трансфектује у 293Т ћелије, а два флуоресцентна сигнала мЦхерри (црвени) и појачани зелени флуоресцентни протеин (еГФП) се детектују уз истовремену експресију након 48 сати, и наслагају се график је означен жутом бојом.
Експресија мЦхерри-еГФП мРНА у 293Т ћелији