У процесу припреме ин витро транскрипције (ИВТ) мРНА, линеаризована плазмидна ДНК је потребна као шаблон за транскрипцију за ИВТ уз помоћ Т7 РНК полимеразе. Висококвалитетна плазмидна ДНК је кључна за ин витро транскрипцију.
На основу платформе за припрему зрелих плазмида, Иаохаи Био-Пхарма може понудити линеаризовану услугу припреме плазмидне ДНК високе чистоће и високог стандарда за постизање ефикасне ИВТ транскрипције.
Детаљи о услугама
| Proces | Опциона услуга | Детаљи услуге | Период испоруке (радним даном) |
| Кружна припрема плазмида | Синтеза гена | Синтеза гена (треће стране) | 7-10 |
| Амплификација плазмида | Амплификација плазмида | 2 |
| Екстракција плазмида |
| Линеаризована припрема плазмида | Линеаризација и пречишћавање плазмида | Линеаризација плазмида | 1 |
| Пречишћавање ДНК линеаризације |
| Контрола квалитета плазмидне ДНК | Чистоћа концентрације | Ултраљубичаста (УВ) спектрофотометрија | 1-2 |
| Конформација плазмида | Електрофореза у агарозном гелу (АГЕ) |
| Капиларна електрофореза (ЦЕ) - опционо |
| Идентификација плазмида | Идентификација рестрикционог ензима/ АГЕ |
Наше карактеристике
Флексибилан избор метода линеаризације
Оптимизација метода екстракције и пречишћавања ДНК за постизање високих стопа опоравка.
- Строга контрола квалитета
Строги стандарди контроле процеса, са стопом суперхеличне конформације узорака плазмида за истраживање од преко 80%.
Висок стандард и високоефикасна припрема плазмида и услуге контроле квалитета како би се задовољиле експерименталне потребе.
Студија случаја
Узимајући производ Иаохаи Био-Пхарма каталога мРНА_луциферазе као пример, узорак плазмида шаблона за транскрипцију (истраживачки степен) има суперхеликални однос већи од 90%, однос линеаризације близу 100%, а накнадни однос транскрипције до 1:200 ( линеаризована плазмидна ДНК:мРНА).
мРНА_луцифераза добијена припремањем линеаризованог плазмида као шаблона је трансфектована у 293Т ћелије, а активност ензим-супстрат реакције је процењена 24 х након трансфекције.
Може се детектовати очигледан јак сигнал активности луциферазе, тј. протеин луциферазе се ефикасно експримира, што сугерише да чистоћа шаблона за транскрипцију може у потпуности да задовољи захтеве висококвалитетног препарата мРНК.
Испитивање односа суперцоилед плазмида
Валидација експресије мРНА луциферазе ин витро
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
