Тестови потенције засновани на ћелијама
Значај теста потенције мРНА
Са брзим развојем мРНК вакцина и терапеутика, потребан је посебан панел метода анализе за тестирање потенције (дефинисање њихове биолошке активности), укључујући транслациону ефикасност мРНК. Ове методе се обично заснивају на трансфекцији ћелија и функционалним тестовима циљног протеина.
Иаохаи Био-Пхарма нуди тестове потенције засноване на ћелијама за мРНА лековите супстанце или ЛНП производе, укључујући трансфекцију ћелија (293Т, ХепГ2, ХеЛа, К562, У937, ћелије Рав264.7, итд.) и ЕЛИСА или Вестерн Блоттинг (ВБ) тестове.
Регулаторни захтеви за тестове потенције
Према регулаторним разматрањима СЗО, „Потентност сваке серије коначне вакцине треба да се одреди коришћењем одговарајуће квантитативне и валидиране функционалне методе. Потенцијални ин витро тестови потенције могу укључивати системе трансфекције засноване на ћелијама или тестове без ћелија. А УСП је препоручио „есеј заснован на ћелијама“ да би се тестирала моћ мРНК, односно експресија циљног протеина.
Аналитицал Метход
|
Анализа
|
Методе
|
|
Тестови потенције
|
Трансфекција заснована на ћелијама и циљни протеин идентификују:
293Т, ХепГ2, ХеЛа, К562, У937, Рав264.7 ћелије, итд.
|
Поступак
Корак 1. Трансфекција заснована на ћелији са мРНА или мРНА-ЛНП
Ћелије су култивисане и трансфектоване са мРНА или мРНА-ЛНП. Детаљније, мРНА се трансфектује након мешања са реагенсом за трансфекцију, док се мРНА-ЛНП директно трансфектује у ћелије. Након 24-48 сати, избистрити супернатант који садржи експримирани протеин центрифугирањем.
Корак 2. Функционални тестови циљног протеина
Урадите ЕЛИСА или ВБ тестове да бисте проценили функционално везивање циљних протеина.
Истраживање случаја
Тестови потенције мРНА узорака на основу ћелија
Иаохаи-БиоПхарма је развила метод теста потенције заснован на ћелијама за мРНА, који укључује ћелијску културу, ћелијску трансфекцију и функционалне тестове протеина. Трансфектовали смо еГФП мРНА, мЦхерри мРНА, мРНА луциферазе, мРНА протеина шиљака у 293Т ћелије и детектовали циљни протеин путем флуоресценције, луминисцентног или обојеног сигнала, ВБ, ЕЛИСА.
Тестови потенције мРНА производа засновани на ћелијама компаније Иаохаи Био-Пхарма
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
