мРНА се широко користи у проучавању функција гена или протеина. У међувремену, уобичајено је у развоју профилактичких и терапеутских биолошких лекова. Као уобичајена стратегија синтезе за РНК молекуле, ин витро транскрипција (ИВТ) нам омогућава да ефикасно добијемо прилагођене транскрипте.
Иаохаи Био-Пхарма је успоставила скуп технологија за синтезу мРНК за обезбеђивање висококвалитетних РНК, као што су дизајн и оптимизација секвенце, ИВТ, пречишћавање, лиофилизација и инкапсулација липидних наночестица (ЛНП). Сви производи се издају под строгим стандардима контроле квалитета (КЦ).
Са избијањем пандемије ЦОВИД-19 2020. године, мРНА технологија је напредовала великим корацима, а њена сродна истраживања и примене су добиле невиђени развој, укључујући профилактичке вакцине за превенцију заразних болести, терапијске онколошке вакцине и лекове, терапију тумора, протеине супституциона терапија, регенеративна медицина и ћелијска и генска терапија (ЦГТ).
мРНА вакцина | мРНА Тхерапеутицс |
|
Proces | Опциона услуга | Детаљи услуге | Период испоруке (радним даном) | Испоручиво |
Дизајн и оптимизација секвенце мРНА | Дизајн и оптимизација кодних секвенци | Дизајн ЦДС секвенце и оптимизација кодона | 1-3 | Датотека секвенце |
Дизајн и оптимизација некодирајућих секвенци | Дизајн и оптимизација УТР, полиА секвенци | |||
Припрема плазмида шаблона за транскрипцију | Припрема рекомбинантног плазмида | Синтеза гена | 7-10 | |
Амплификација и екстракција плазмида | 4 | |||
Линеаризација и пречишћавање плазмида | ||||
мРНА ин витро транскрипција | Ограничавање ко-транскрипције (метода у једном кораку) | Ин витро транскрипција (ИВТ) / Цап аналог | 1-2 | Н / Д |
Модификације нуклеотида (УТП/ЦТП модификације) | ||||
Уклањање ДНК шаблона (ДНаза И) | ||||
Ензимско затварање (процес у два корака) | ИВТ | 2-3 | ||
Модификације нуклеотида (УТП/ЦТП модификације) | ||||
Уклањање ДНК шаблона (ДНаза И) | ||||
пречишћавање мРНА (литијум хлорид/магнетне перле) | ||||
Ензимско затварање | ||||
мРНА Пурифицатион | Конвенционална шема пречишћавања | Преципитација литијум хлорида | 1 | мРНА лековита супстанца |
Пречишћавање магнетних перли | ||||
Шема пречишћавања хроматографске колоне | Комбинација вишеструких метода хроматографије | 1-2 | ||
Размена бафера | Ултрафилтрација | 1 | ||
мРНА лиофилизација | Лиофилизација | Пре-фризинг | 2-3 | мРНА лиофилизовани прах |
Примарно сушење (сублимација) | ||||
Секундарно сушење (десорпција) | ||||
мРНАЕнцапсулатион | ЛНП инкапсулација | ЛНП инкапсулација | 2-3 | мРНА-ЛНПДруг производ |
Концентрација и размена пуфера | ||||
Анализа квалитета мРНА | мРНА лековита супстанца/ лиофилизовани прах | Концентрација, чистоћа | 1 | Тест извештај |
Интегритет, ефикасност затварања, полиА реп расподела | 2-5 | |||
мРНА-ЛНП лек | Ефикасност енкапсулације | 1 | ||
Величина честица и дистрибуција | ||||
Површински набој | ||||
Валидација експресије мРНА | 293Т евалуација ћелија | Целл платинг | 4 | |
Пролазна трансфекција ћелија | ||||
Посматрање флуоресцентног сигнала | 1-3 | |||
Вестерн блот (ВБ)/ ензимски имуносорбентни тест (ЕЛИСА) |
5' Кап | ▪ Неограничено ▪ Цап0, цо-цаппед ▪ Цап1, цо-цаппед ▪ Цап1, ензимско затварање |
5' УТР/3' УТР | ▪ Природна УТР секвенца ▪ Мутантна/инжењерска УТР секвенца |
3' ПолиА Таил | ▪ 100А ~120А реп (препоручено) ▪ Сегментирани полиА реп ▪ Други прилагођени репови |
Модификовани нуклеозиди | ▪ Немодификоване базе ▪ Псеудоуридин (Ψ) ▪ Н1-метилпсеудоуридин (Н1Ψ) ▪ 5-метилцитозин (м5Ц) ▪ 5-метилуридин (м5У) ▪ 5-метоксиуридин (5моУ) ▪ 2-тиуридин (с2У) ▪ 2′-О-метил-У ▪ Остале модификације |
Интегрисани ток услуга
Пружа низ услуга од дизајна фронт-енд секвенце до позадинске припреме мРНА, контроле квалитета и валидације експресије.
Међународни дизајн и оптимизација најсавременијих секвенци
Професионални дизајн и оптимизација секвенце мРНА олакшавају ефикасну експресију мРНА.
Диверзификоване нуклеотидне модификације
Ефикасно повећавају експресију мРНА и смањују штетне имуне одговоре на мРНА.
Платформа за зрело пречишћавање
Комбиновањем конвенционалне и самостално дизајниране методе пречишћавања, узорци мРНА се добијају високе чистоће
Комплетна КЦ платформа
Обогатите КЦ опције да бисте испунили захтеве рутинских тестова, као што су концентрација, чистоћа А260/280 и интегритет, као и захтеви за контролу високог квалитета, као што је ефикасност затварања/дистрибуција полиА.
Брза достава
Прилагођена мРНА се може испоручити у року од 7 дана, осим за синтезу секвенце која је додељена екстерним извођачима.