У поређењу са ензимским затварањем у два корака, метода ко-транскрипционог затварања у једном кораку може значајно смањити ток процеса. Метода је оријентисана на резултате и укључује додавање аналога капи у реакцију ин витро транскрипције (ИВТ). Аналози капице могу се увести на почетку транскрипције, а мРНА са кап структуром се може добити по завршетку транскрипције. Тренутни аналози капа треће генерације могу да избегну обрнуто затварање и директно додају Цап 1 структуру производу транскрипције.
За разматрање имуногености мРНА ин виво и ефикасности транслације, ИВТ процес често усваја одређене врсте модификованих НТП-ова, а уобичајени модификовани нуклеотиди су псеудоуридин (Ψ), Н1-метил-псеудоури-дин (Н1Ψ) и 5-метилцитозин (5мЦ) .
Слика: Дијаграм ко-транскрипционе и затварајуће реакције мРНА
Детаљи услуге
сервис | Детаљи услуге | Период испоруке (радним даном) |
Ограничавање ко-транскрипције | Ин витро транскрипциони одговор (аналог Цлеан Цап) | 1-2 |
| Модификације нуклеотида (Ψ/Н1Ψ/5мЦ) |
| Уклањање ДНК шаблона (ДНаза И) |
Оптимизација ИВТ услова - опционо | Дизајн и оптимизација реакционих компоненти | 3-7 |
Наше карактеристике
- Стратегије модификације разноврсних нуклеотида
Вишеструке опционе стратегије модификације нуклеотида могу побољшати експресију протеина.
- Оптимизовани реакциони систем
Остварите висок однос транскрипције и високу ефикасност затварања.
- Стабилан процес затварања
Остварите стопу ограничења од више од 95%.
Ефикасно спречити деградацију мРНК строгим контролисањем РНКазе у експерименталном окружењу и потрошном материјалу.
Студија случаја
Иаохаи Био-Пхарма је изградила зрелу платформу процеса ко-транскрипционог затварања, користећи аналоге чисте капице за директно додавање структуре Цап1 уз избегавање обрнутог затварања. Након стандардизованог претходног третмана узорка и детекције капиларне електрофорезе (ЦЕ), стопа затварања мРНА побољшаног зеленог флуоресцентног протеина (еГФП) може достићи више од 95%.
Ефикасност затварања еГФП мРНА већа од 95%
еГФП мРНА и мЦхерри мРНА припремљене ко-транскрипционим затварањем се трансфектују у 293Т ћелије, респективно, а јак флуоресцентни сигнал се примећује након 48 х, што сугерише да је мРНА ефикасно експримирана у 293Т ћелијама.
Експресија еГФП мРНА и мЦхерри мРНА у 293Т ћелији
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
