Производи добијени ин витро циклизацијом и РНазом Р обогаћивањем захтевају даље уклањање из ин витро транскрипције (ИВТ), укључујући непотрошене супстрате у реакцији циклизације, нуспроизводе реакције и изрезану РНК.
Иаохаи Био-Пхарма има зрело таложење ЛиЦл, пречишћавање магнетним куглицама, пречишћавање које је сам развило и друга разноврсна решења за пречишћавање за ефикасно уклањање различитих нечистоћа и припрему високо чисте цирцРНА.
Раствор за пречишћавање малих количина цирцРНА за трансфекцију ћелија и као део експеримената на животињама.
Раствор за пречишћавање малих количина цирцРНА за трансфекцију ћелија и као део експеримената на животињама.
Сценарији апликација са вишим квалитетом;
Стабилан и скалабилан процес пречишћавања како би се испунили ГМП производни захтеви.
Proces | Опциона услуга | Детаљи услуге | Период испоруке (дан) | Деливераблес |
цирцРНАпурифицатион | Конвенционално решење за пречишћавање | Преципитација литијум хлорида | 1 | цирцРНА лековита супстанца |
Пречишћавање магнетних перли | ||||
Високо чисто пречишћавање цирцРНА | Препаративна течна хроматографија високих перформанси (ХПЛЦ) | 1-2 | ||
Размена бафера | Ултрафилтрација | 1 | ||
цирцРНА контрола квалитета | Концентрација / пречишћавање | Ултраљубичаста (УВ) спектрофотометрија | 0.5 | Тест извештај |
Чистоћа | Електрофореза у агарозном гелу (АГЕ)/Е-гел | |||
ХПЛЦ-опционо | 1 |
Могу се остварити сценарији примене.
цирцРНА са чистоћом већом од 90%;
Кроз строгу контролу РНаза у експерименталном окружењу и потрошном материјалу, деградација РНК се ефикасно спречава.
Иаохаи Био-Пхарма је успоставила зрело решење за пречишћавање цирцРНА које може ефикасно уклонити различите нечистоће повезане са процесом.
Кружни РНК производи пречишћени конвенционалним раствором су и даље очигледно помешани са урезаном РНК и интронима.
Након раствора за пречишћавање који је развио Иаохаи Био-Пхарма, различите линеарне РНК нечистоће, као што су урезане РНК и интрони, могу се успешно уклонити.
Валидација експресије цирцРНА
Коришћењем конвенционалног липозома, пречишћена еГФП цирцРНА се трансфектује у 293Т ћелије, а сигнал флуоресценције се примећује након 24 х и наставља да се појачава 48 х. Сигнал флуоресценције се и даље може детектовати 7. и 14. дан након трансфекције.