Bepaling van Moleculair Gewicht door LC-MS
Het intacte moleculair gewicht wordt altijd gezien als een belangrijke kenmerk van biologische producten. De analyse van het intacte moleculair gewicht wordt gebruikt om proteïne/peptiden te demonstreren en de biologische producten te verifiëren. Het meten van het molecuulgewicht is een vereiste van de reguliere richtlijnen.
Yaohai Bio-Pharma biedt analyse van intact moleculair gewicht aan onder native, gereduceerde, N-deglycosylated condities. Wij gebruiken Vloeistofchromatografie-Massa Spectrometrie (LC-MS) om het intacte moleculair gewicht te bepalen.
Regelgevende Eisen voor Moleculair Gewicht
In de ICH Q6 wordt aanbevolen dat “het moleculair gewicht (of grootte) wordt bepaald met behulp van uitsluitingschromatografie, SDS-polyacrylamide gel electrophorese (onder reducerende en non-reducerende condities), massaspectrometrie (MS) en andere geschikte technieken”.
Analytische methoden
| Analyse |
Methoden |
| Moleculair gewicht |
LC-MS / Vloeistofchromatografie/Electrospray Massaspectrometrie (LC/ES-MS) van native, gereduceerde, N-deglycosyliceerde eiwitten of subeenheden |
Analytische Procedures
Gehele molecuulgewicht:
- Uitvoeren van LC-MS op het originele monster.
- LC-MS-gegevensanalyse.
Gereduceerd molecuulgewicht:
- Behandelen van het eiwitmonster met een geschikte reducerende stof;
- Uitvoeren van LC-MS op het gereduceerde eiwit;
- LC-MS-gegevensanalyse.
N-deglycosyliceerd molecuulgewicht:
- Verwijderen van de N-glycanen met een geschikte enzym;
- Uitvoeren van LC-MS op het N-deglycosyliceerde eiwit;
- LC-MS-gegevensanalyse.
Gereduceerd en N-deglycosyliceerd molecuulgewicht:
- Behandelen van het eiwitmonster met een geschikte reducerende stof;
- Verwijderen van de N-glycanen met een geschikte enzym;
- Uitvoeren van LC-MS op gereduceerd en N-deglycosyliceerd eiwit;
- LC-MS-gegevensanalyse.
Molecuulgewicht van eiwitsubeenheid:
- Subeenheid scissie
- Uitvoeren van LC-MS op eiwitsubeenheid
- LC-MS gegevensanalyse
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
