N-glycan profileren is essentieel voor de productie van biologische geneesmiddelen. Yaohai Bio-Pharma biedt een N-glycan profileringservice aan met behulp van Vloeistofchromatografie-Massa Spectrometrie (LC-MS) van vrijgekomen en gelabelde glycanen. De algemene stappen voor het voorbereiden van een N-glycan monster omvatten de vertering van het glycoprocein (GP), de-glycosylering, zuivering, labelen/derivatisering, en Solid Phase Extractie (SPE).
Wij zijn betrokken bij de eiwitstructuur karakterisatie van verschillende grote moleculen, waaronder Recombinante Sub-eenheden Vaccins, Nanolichamen/VHHs/Single-domain Antibodies (sdAbs), Antibody Fragmenten, Hormonen/Peptiden, Cytokines, Groeifactoren (GF), Enzymen, Collagens, etc.
Regelgevingseisen voor N-Glycan Profileren
Volgens de ICH Q6B-richtlijn, wordt bij glycoproteïnen de koolhydraatinhoud (neutrale suikers, aminosuikers en sialinezuur) bepaald. Daarnaast worden de structuur van de koolhydraatkettingen, het oligosacharidepatroon (antennaprofiel) en de glycosylatieplaats(en) van de polypeptide keten geanalyseerd in zoverre mogelijk.
Analytische Methode
| analyse |
Methoden |
| N-glycan Profileren |
Vloeistofchromatografie-Massa Spectrometrie (LC-MS) analyse van vrijgekomen en gemarkeerde glycans |
procedures
1. Enzymatische glycanvrijmaking met Peptide N-Glycosidase F (PNGase F)
2. Derivatisering van vrijgekomen glycans door 2-aminobenzamide (2-AB)
3. Purificatie van de geoogste N-glycans op een TSK Amide - 80 kolom indien grote hoeveelheden wasmiddelen, niet-verdampte zouten of materialen met vrije aminogroepen aanwezig zijn
4. Markeerdering met fluorescerende 2-aminobenzamide (2-AB)
5. LC-MS analyse van gemarkeerde N-glycans
6. Het is een schande. Gegevensanalyse
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
