De deamidatie van glutamine- en asparaginezijdeketens is een veelvoorkomende modificatie in termen van invloed op de eigenschappen van eiwitbiomedicijnen. Deamidatie kan optreden in glutaminine-resten, maar meestal met een veel lagere snelheid. De snelheden van deamidatie worden beïnvloed door temperatuur, pH, lokale eiwitstructuur en aangrenzende aminozuurresten.
Yaohai BioPharma biedt een testdienst voor aminozuurdeamidatie aan, waarmee u aminozuurdeamidatie kunt detecteren door middel van Vloeistofchromatografie-Massa Spectrometrie (LC-MS).
Wij zijn betrokken bij de structuurkarakterisering van eiwitten van verschillende grote moleculen, waaronder Recombinante Subeenheid Vaccins, Nanolichamen/VHH's/Single-domain Antibodies (sdAbs), Antibody Fragmenten, Hormonen/Peptiden, Cytokines, Groeifactoren (CF), Enzymen, Collagenen, enz.
Reguliere vereisten voor aminozuurdeamidatie
Volgens de ICH Q6B richtlijnen kunnen deamidatievormen worden gedetecteerd en gekarakteriseerd door chromatografische, elektroforetische en/of andere relevante analytische methoden.
Analytische methoden
| Analyse |
Methoden |
| Deamidatie |
Vloeistofchromatografie-Massa Spectrometrie (LC-MS) |
Procedures
bijv., asparaginedeamidatie
1. Enzymatische digestie
2. LC-MS onder de High-Performance Liquid Chromatografie (HPLC) conditie
3. Data-analyse
Asparagine deamidatie vindt plaats via een succinimide tussenproduct (Suc), dat gevoelig is voor racemisatie en hydrolyse, wat vier Asp-isomeren oplevert, inclusief L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp en D-IsoAsp.
In theorie kan glutamine deamidatie vier overeenkomstige Glu-isomeren genereren via een proces dat gelijkaardig is aan Asn-deamidatie.
De hoge resolutie massa-spectrometrie identificeert gemakkelijk het 1-Da massa-verschil tussen peptiden met Asn/Gln en hun overeenkomstige deamidateerde tegenhangers Asp/Glu.
NL
EN
AR
HR
CS
DA
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
