Kenalpasti Komposisi Lipid LNP dan Kuantiti
Kepentingan Analisis Komposisi Lipid LNP
Lipid nanopartikel (LNPs), yang terdiri daripada lipid kationik, kolesterol, fosfolipid, dan lipid konjugat PEG, berfungsi sebagai sistem penyampaian yang menonjol untuk produk ubat mRNA. Kestabilan dan kecairan dwilapisan LNP bergantung pada sifat dan kandungan pelbagai lipid yang digunakan dalam sistem perumusan. Komposisi lipid adalah sangat penting untuk seberapa baik LNP menyampaikan ubat.
Yaohai-BioPharma menyediakan penyelesaian untuk mengenal pasti dan mengukur komposisi lipid mRNA-LNP menggunakan kromatografi cecair berprestasi tinggi dengan kaedah pengesanan aerosol bercas (HPLC-CAD).
Keperluan Kawal Selia untuk Komposisi Lipid
Menurut pertimbangan kawal selia WHO, "Komposisi akhir vaksin, termasuk lipid, harus diterangkan bersama-sama dengan kuantiti komponen dalam setiap pembentangan."
Kaedah Analisis
Analisis |
Kaedah |
Komposisi Lipid |
HPLC digabungkan dengan Pengesan Aerosol Bercas Corona (CAD) |
Prosedur
Langkah 1. Penyediaan Sampel Lipid
Pemilihan bahan pelarut adalah amat penting untuk analisis komponen lipid dalam produk ubat mRNA-LNP. Pelarut harus secara berkesan melarutkan setiap komponen lipid dan mengganggu sebarang interaksi antara lipid dan mRNA terkapsul. Pelarut yang berpotensi merangkumi etanol, etanol/dimetil sulfoksida (DMSO), etanol/formamida, etanol/trietilamin asetat, dan lain-lain.
Langkah 2. HPLC-CAD
Kromatografi cecair fasa terbalik (RP-HPLC) yang dipasangkan dengan pengesan aerosol bercas (CAD) telah dimasukkan ke dalam ujian komposisi lipid LNP. Memandangkan lipid kekurangan kromofor dan tidak menyerap sinaran ultraungu (UV) tanpa derivatisasi, volatilisasi lazimnya mencabar. CAD, kerana lebih sensitif, boleh membezakan spektrum kandungan lipid yang lebih luas. Sebelum ini, kromatografi cecair berprestasi tinggi (UHPLC) ditambah dengan kaedah pengesan aerosol bercas (CAD) telah dirumus dan digunakan dalam analisis lipid untuk kajian LNP RNA (siRNA) mengganggu kecil.
Langkah 3. Analisis data
Kuantiti setiap lipid dalam sampel melibatkan pengiraan yang diperoleh daripada lengkung piawai didarab dengan faktor pencairan. Proses ini menghasilkan kandungan lipid untuk setiap konstituen dalam sampel mRNA-LNP.
Kes Analisis Komposisi Lipid LNP dengan HPLC-CAD
Berdasarkan HPLC-CAD, Yaohai-BioPharma telah membangunkan kaedah yang mantap untuk analisis komponen lipid mRNA-LNP. Kaedah ini telah disahkan sebagai linear, boleh berulang, tepat, tepat, dan khusus untuk formulasi LNP, yang boleh menyokong pembangunan proses, pembangunan formulasi, ujian kestabilan dan pelepasan mRNA-LNP.
Profil kromatografi 4 lipid oleh kaedah HPLC-CAD Yaohai-BioPharma
Kelinearan kaedah HPLC-CAD Yaohai-BioPharma (R2＞0.99)
EN
