Ujian Potensi Berasaskan Sel
Kepentingan Ujian Potensi mRNA
Dengan perkembangan pesat vaksin dan terapeutik mRNA, panel kaedah analisis khusus diperlukan untuk menguji potensi (mendefinisikan aktiviti biologi mereka), yang melibatkan kecekapan translasi mRNA. Kaedah ini biasanya berdasarkan pemindahan sel dan ujian fungsi protein sasaran.
Yaohai Bio-Pharma menawarkan ujian potensi berasaskan sel untuk bahan ubat mRNA atau produk LNP, termasuk pemindahan sel (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, sel Raw264.7, dll.) dan ujian ELISA atau Western Blotting (WB).
Keperluan Kawal Selia untuk Ujian Potensi
Menurut pertimbangan kawal selia WHO, “Potensi setiap lot vaksin akhir harus ditentukan menggunakan kaedah fungsian kuantitatif dan disahkan yang sesuai. Potensi ujian potensi in vitro mungkin termasuk sistem pemindahan berasaskan sel atau ujian bebas sel." Dan USP mengesyorkan "ujian berasaskan sel" untuk menguji potensi mRNA, iaitu, ekspresi protein sasaran.
Kaedah Analisis
|
Analisis
|
Kaedah
|
|
Ujian Potensi
|
Transfeksi berasaskan sel dan protein sasaran mengenal pasti:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, sel Raw264.7, dsb.
|
Prosedur
Langkah 1. Transfeksi berasaskan sel dengan mRNA atau mRNA-LNP
Sel-sel dibiakkan dan ditransfeksi dengan mRNA atau mRNA-LNP. Secara terperinci, mRNA ditransfeksi selepas dicampur dengan reagen transfeksi, manakala mRNA-LNP ditransfeksi terus ke dalam sel. Selepas 24-48 jam, jelaskan supernatan yang mengandungi protein yang dinyatakan dengan sentrifugasi.
Langkah 2. Ujian Fungsian Protein Sasaran
Lakukan ujian ELISA atau WB untuk menilai pengikatan fungsi protein sasaran.
Kajian kes
Ujian Potensi Berasaskan Sel bagi Sampel mRNA
Yaohai-BioPharma telah membangunkan kaedah ujian potensi berasaskan sel untuk mRNA, yang melibatkan kultur sel, pemindahan sel dan ujian fungsi protein. Kami mengalihkan mRNA eGFP, mRNA mCherry, mRNA luciferase, mRNA protein spike ke dalam sel 293T, dan mengesan protein sasaran melalui isyarat pendarfluor, luminescent atau berwarna, WB, ELISA.
Ujian Potensi Berasaskan Sel bagi Produk mRNA oleh Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
