semua Kategori
ENEN
Reka Bentuk Jujukan mRNA

Reka Bentuk Jujukan mRNA

Laman Utama >  RNA IVT  >  Sintesis RNA tersuai  >  Sintesis mRNA tersuai  >  Reka Bentuk Jujukan mRNA

RNA IVT

Reka Bentuk Jujukan mRNA

Menurut dogma pusat, messenger RNA (mRNA) ialah jambatan untuk penghantaran bahan genetik daripada DNA kepada protein.

mRNA memainkan peranan biologi dengan mengekod protein dalam vivo, dan mRNA matang dalam organisma eukariotik terdiri daripada lima komponen: 5' Cap (struktur topi), 5' UTR (rantau bukan pengekodan), ORF (bingkai bacaan terbuka), 3′ UTR , dan ekor poliA 3' (ekor poliadenylat).

undefined

Butiran Perkhidmatan
ProsesPerkhidmatan PilihanButiran PerkhidmatanTempoh Penghantaran (Hari)
reka bentuk jujukan mRNA dan pengoptimumanReka bentuk dan pengoptimuman urutan pengekodan

Penjajaran jujukan CDS

Pengoptimuman kodon CDS

1
Reka bentuk dan pengoptimuman jujukan bukan pengekodan

Reka bentuk dan pengoptimuman jujukan 5' UTR

Reka bentuk dan pengoptimuman jujukan 3' UTR

reka bentuk jujukan polyA dan pengoptimuman

1-2
Pilihan Tersuai
5' UTR/3' UTR
  • Urutan UTR alam semula jadi
  • Urutan UTR Mutant/Engineered
Ekor PolyA 3'
  • 100A ~120A Ekor (disyorkan)
  • Ekor polyA terbahagi
  • Ekor tersuai lain
Strategi Biasa untuk Reka Bentuk Jujukan mRNA
Komponen mRNAFungsi BiologiStrategi Pengoptimuman
5' CapLindungi mRNA daripada degradasi oleh exonucleases dan bertindak bersama-sama dengan ekor polyA di hujung 3', protein pengikat polyA dan protein faktor permulaan terjemahan untuk memulakan terjemahan protein.Struktur Cap1 semulajadi mengelakkan reseptor pengecaman corak dan dengan itu mengurangkan tindak balas imun semula jadi, yang boleh dicapai dengan pengehadan bersama transkripsi satu langkah atau pengehadan enzimatik dua langkah [lihat pengehadan enzimatik mRNA dan pengehadan bersama transkrip untuk butiran].
5' UTRUTR 5' boleh dikenali oleh ribosom, mengawal terjemahan mRNA dan menjejaskan kestabilan mRNA.Mengandungi jujukan Kozak tanpa struktur sekunder yang sangat stabil. UTR semulajadi gen yang sangat dinyatakan lebih disukai untuk mRNA transkripsi in vitro (IVT) seperti α-globin dan β-globin.
CDSKawasan pengekodan protein dan urutan pengekodan untuk antigen, antibodi atau protein berfungsi lain.Pengoptimuman kodon meningkatkan tahap terjemahan, dengan menyatakan bahawa kodon tidak optimum tertentu mungkin memainkan peranan dalam lipatan protein.
3' UTRKawal selia terjemahan dan kestabilan mRNA.UTR semulajadi gen yang sangat dinyatakan lebih disukai untuk mRNA IVT seperti α-globin dan β- globin.
3' ekor poliAKawal selia ekspresi protein dan lindungi struktur penutup daripada degradasi.Panjang yang mencukupi (100-150 bp) diperlukan; pengekodan ekor polyA pada plasmid templat transkripsi memastikan panjang ekor polyA yang lebih jelas.
Ciri-ciri kami
  • Pemilihan sumber UTR yang pelbagai

Berbilang sumber perpustakaan UTR semula jadi & diubah suai dengan ketara; strategi pengubahsuaian UTR yang matang;

  • Pasukan pengoptimuman CDS yang canggih

Bekerjasama dengan pasukan algoritma AI profesional untuk melengkapkan pengoptimuman kodon.

  • Malah pengedaran ekor polyA

Tambah jujukan polyA mengikut templat DNA untuk mengawal panjang mRNA dengan lebih tepat.

  • Gabungan pengoptimuman yang pelbagai

Mencapai ekspresi mRNA yang cekap dengan imunogenisitas rendah.

Kajian kes

Reka Bentuk Jujukan mRNA dwi-pelapor: mRNA mCherry-eGFP

Perkhidmatan mRNA Yaohai Bio-Pharma terus dipertingkatkan dengan reka bentuk dan pengoptimuman jujukan bersama gen wartawan berganda, yang mencapai ekspresi bersama gen dwi.

Menggunakan reagen transfeksi konvensional, jujukan gen berganda mCherry-eGFP mRNA ditransfeksi ke dalam sel 293T, dan dua isyarat pendarfluor mCherry (merah) dan protein pendarfluor hijau yang dipertingkatkan (eGFP) dikesan dengan ekspresi serentak selepas 48 jam, dan timbunan graf diserlahkan dengan warna kuning.

图片

图片

Ekspresi mRNA mCherry-eGFP dalam sel 293T

Dapatkan Quote Percuma

Berhubung